[发明专利]在不同条件下利用多种测量方法对双链体或三链体杂交进行均相分析

摘要

本发明提供了用于核酸杂交、检测和评价的均相分析方法。所述分析包括：在将电压施加于测试样品之前和过程中从测试样品中得到信号，以及使信号相互关联，每一所述信号都是探针与靶相互结合亲和力的指征。由于可校准电压从而显著地使除完全互补杂交以外的任何杂交去稳定，所述分析能检测探针与靶间的匹配程度。其大小与结合亲和力相关的信号可以是电导和/或荧光强度。优选对两种信号对进行测量和比较，从而增强分析的可靠性。所述分析可以检测单链探针与非变性的双链靶之间形成三链体的特异性杂交，因此无需使靶变性。该分析方法也可应用于双链杂交复合体。

主权项

1.一种分析序列特异性杂交的方法，所述方法包括：提供包含至少一种核酸序列的靶；提供包含核酸或核酸类似物序列的探针；将所述探针和所述靶加入杂交介质，以提供检测样品；将第一刺激物施加到所述检测样品上，以提供第一受激检测样品；从所述第一受激检测样品中检测第一信号，其中所述第一信号与所述探针和所述靶间的结合亲和力相关；根据参照样品所显示的参照信号校准所述第一信号，所述参照样品包括与所述靶结合的至少一种参照探针，其中相对于所述靶，各所述探针和所述至少一种参照探针是选自如下组的不同成员：完全匹配、单碱基错配、二碱基错配、三碱基错配、单碱基缺失、二碱基缺失和三碱基缺失；以及由所述校准来确定所述探针与所述靶之间匹配程度的第一测定值；将第二刺激物施加到所述第一受激检测样品上，以提供第二受激检测样品；从所述第二受激检测样品中检测第二信号，其中所述第二信号与所述探针和所述靶间的结合亲和力相关；由所述第二信号的所述检测来确定所述探针与所述靶之间所述匹配程度的第二测定值；以及比较所述第一测定值和所述第二测定值。