[发明专利]蛋白质表达的图析

摘要

公开了用于检测少量分析物如蛋白质和多肽的组合物和方法。该方法涉及将引物与分析物相连，然后利用引物介导环状DNA分子的滚环复制。DNA环的复制依赖于引物的存在。这样，本发明公开的方法通过滚环复制可以从任何目的分析物产生出扩增的信号。扩增的DNA通过引物仍与分析物相连，这样就可以对分析物进行立体的检测。本发明的方法可用于检测并分析蛋白质或多肽。通过微矩阵可以分析多种蛋白质，其中各种蛋白质被固定到该微矩阵上。这样，利用引物和能够特异性地结合待测蛋白质的分子的偶联物，滚环复制引物与各种蛋白质相连。引物的滚环复制会在矩阵中该蛋白质被固定的位点产生大量的DNA产物。该扩增的DNA可作为该蛋白质的简易检测的信号。本发明的方法还可以用于比较在两种或更多样品中表达的蛋白质。所得到的信息与在核酸表达体系中收集到的信息类型相似。本发明的方法可以对在任何细胞或组织中表达的蛋白质进行灵敏、准确的检测并定量测定。

主权项

1.检测一种或多种分析物的方法，该方法包括：(a)使一种或多种分析物样品与一种或多种指示子结合引物接触，其中每种指示子结合引物包含一个特异性结合分子以及一个滚环复制引物，其中每种特异性结合分子与一种分析物直接或间接地相互作用，以及在促进所述特异性结合分子与分析物的相互作用的条件下，孵育所述分析物样品和指示子结合引物，(b)在步骤(a)之前、同时或之后，使所述指示子结合引物与一种或多种扩增的靶环接触，其中每个扩增的靶环包含一个单链环状DNA分子，该分子包含一个引物互补部分，其中该引物互补部分与至少一个滚环复制引物互补，以及在促进扩增的靶环与滚环复制引物之间杂交的条件下，孵育所述指示子结合引物与扩增的靶环，(c)在步骤(b)之后，并在步骤(a)之前、同时或其后，在促进扩增的靶环复制的条件下，孵育所述指示子结合引物和扩增的靶环，其中所述扩增的靶环的复制引起串联的DNA序列的形成，其中检测出串联的DNA序列表明相应的分析物的存在，其中所述分析物是在步骤(a)、(b)或(c)之前，同时或之后从分析物样品中分离出来的。