[发明专利]检测核酸的材料和方法

摘要

本发明描述了利用非天然碱基的测试分析。在一个实施方案中，本方法包括将怀疑含有靶核酸的样品与聚合酶和第一和第二引物接触；如果样品中存在靶核酸，利用第一和第二引物通过PCR扩增靶核酸，以便产生具有一个双链区和一个含有非天然碱基的单链区的扩增产物；将该样品与含有标记和与单链区的非天然碱基互补的非天然碱基的报道分子接触；至少将报道分子的一部分与扩增产物的单链区退火；在退火后，至少将报道分子的一部分裂解，以便至少释放一个报道分子片段；并且将该至少一个报道分子片段的释放与样品中的靶核酸的存在进行关联。本发明也提供了用于检测样品中的靶核酸的对应的试剂盒。或者，将报道分子掺入扩增产物而不是退火和然后裂解。

主权项

1.在样品中检测靶核酸的方法，该方法包括：a)将样品与核酸聚合酶、第一寡核苷酸引物和第二寡核苷酸引物接触，第一寡核苷酸引物含有与靶核酸的第一部分互补的序列；第二寡核苷酸引物含有第一区和第二区，第一区含有与靶核酸的第二部分互补的序列，第二区含有一个非天然碱基；b)如果样品中存在靶核酸，利用第一和第二寡核苷酸引物通过PCR扩增靶核酸，产生扩增产物，该产物具有(i)双链区，和(ii)含有非天然碱基的单链区；c)将样品与含有一个标记和一个与单链区的非天然碱基互补的非天然碱基的报道分子接触；d)至少将报道分子的一部分与扩增产物的单链区退火；e)在退火后，至少裂解报道分子的一部分，从而释放至少一个报道分子片段；和f)将至少一个报道分子片段的释放与样品中靶核酸的存在进行关联。