[发明专利]细胞壁降解酶变体

摘要

本发明公开了具有β－螺旋结构的细胞壁降解酶的变体，该变体在如下方式确定的位置中具有至少一个替代，所述方式是：鉴定可能属于堆积的所有残基；将该堆积表征为内部的或外部的；基于亲代或野生型酶堆积残基的主要特征和/或其相对于β－螺旋的取向(内部的或外部的)，将该堆积表征为极性的、疏水性的或芳香族/杂芳香族的；将堆积中的所有堆积位置优化为疏水性脂肪族氨基酸、疏水性芳香族氨基酸或极性氨基酸，实施方式是将一个或所有位置突变为属于以上其中一组的氨基酸；通过DSC或应用相关试验如浸轧汽蒸染色应用试验，测量变体的热稳定性；然后选择稳定化的变体。优选当与包含SEQIDNO：2氨基酸序列的果胶酸裂解酶比对时具有保守氨基酸残基D111、D141或E141、D145、K165、R194和R199的野生型亲代果胶酸裂解酶(EC4.2.2.2)的变体。

主权项

1.当与包含SEQIDNO：2氨基酸序列的果胶酸裂解酶比对时具有保守氨基酸残基D111、D141或E141、D145、K165、R194和R199的野生型亲代果胶酸裂解酶(EC4.2.2.2)的变体，其中该变体在至少一个选自下组位置的位置上发生替代：5、8、9、10、19、38、39、40、41、55、56、59、61、64、71、72、82、83、90、100、102、109、112、114、117、129、133、136、137、139、142、144、160、163、164、66、167、168、169、171、173、179、189、192、197、198、200、203、207、214、220、222、224、230、232、236、237、238、244、246、261、262、264、265、266、269、278、282、283、284、285、288、289和297。