[发明专利]合成多核苷酸的方法有效
申请号: | 01819083.9 | 申请日: | 2001-09-19 |
公开(公告)号: | CN1474870A | 公开(公告)日: | 2004-02-11 |
发明(设计)人: | 长岭宪太郎 | 申请(专利权)人: | 荣研化学株式会社 |
主分类号: | C12N15/09 | 分类号: | C12N15/09;C12Q1/68 |
代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 | 代理人: | 巫肖南;封新琴 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | 本发明通过将具有能形成环的结构的多核苷酸用作模板,并联合使用多个能为该环提供互补链合成起点的引物,使等温和快速的多核苷酸合成成为现实。如果使用LAMP法,由于也可通过等温反应合成模板多核苷酸本身,因此可等温和快速进行所有反应。 | ||
搜索关键词: | 合成 多核苷酸 方法 | ||
【主权项】:
1.合成多核苷酸的方法,其含有下列步骤:混合下列组分1至5,并在允许使用4中的DNA聚合酶进行依赖于模板的互补链合成的条件下进行保温:(1):模板多核苷酸,其:(a)具有含有至少一套互补核苷酸序列的靶核苷酸序列,(b)当(a)中的互补核苷酸序列杂交时即形成能碱基配对的环,(c)通过使其3’-末端与其自身退火而形成环,和(d)与其自身退火的3’-末端可成为使用其自身为模板的互补链合成的起点;(2):至少两种引物,所述引物可在模板多核苷酸环上的不同位置处提供互补链合成起点;(3):至少一种引物,所述引物可在环中与2中所述的引物不同的位置处提供互补链合成起点,所述环是通过模板多核苷酸和/或使2中所述的引物与模板多核苷酸退火而产生的延伸产物形成的;(4):催化伴随着链置换的互补链合成的DNA聚合酶;和(5):互补链合成的底物。
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