[发明专利]收集以及使用细胞核mRNA的方法有效
| 申请号： | 01821394.4 | 申请日： | 2001-10-25 |
| 公开（公告）号： | CN1606621A | 公开（公告）日： | 2005-04-13 |
| 发明（设计）人： | M·米特苏哈施 | 申请（专利权）人： | 日立化学研究中心;日立化成工业株式会社;株式会社日立制作所 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 中国专利代理(香港)有限公司 | 代理人： | 孟凡宏 |
| 地址： | 美国加利*** | 国省代码： | 美国;US |
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| 摘要： | 常规基因表达系统和纯化方法目标集中于整个细胞中存在的mRNA。因此，其结果显示为新转录mRNA以及消化mRNA的总和。因此，以前难以在mRNA正在消化的情况下检测新mRNA的表达。而且，当已经存在大量mRNA时，难以检测mRNA量的微小变化，因此敏感性低。已证实新合成的mRNA位于细胞核中，集中于这一事实开发了一种新方法。将细胞捕获在膜上，并用细胞膜透化溶液如NP－40处理，由此增加细胞膜的通透性。在洗去胞质后，用细胞溶解液溶解细胞核，然后由因此获得的溶液成功回收mRNA。该方法非常简单，仅需要2－3分钟的额外时间，但可以处理大量的样品，并且该方法可并入到自动化系统中。因此，该方法有可能成为处理基因表达分析样品的标准方法，特别是对于RT－PCR。 | ||
| 搜索关键词： | 收集 以及 使用 细胞核 mrna 方法 | ||
【主权项】：
1.一种检测细胞基因表达的方法，该方法包括：将细胞捕获在滤膜或膜上；使所述细胞与细胞膜透化溶液接触，以增加细胞膜的通透性；清洗细胞质；使洗去细胞质的细胞与细胞溶解溶液接触，以溶解细胞核，由此获得细胞核溶液；由所述细胞核溶液回收RNA；根据回收的RNA量确定细胞的基因表达。
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