[发明专利]修饰真核细胞的方法有效
申请号: | 01821660.9 | 申请日: | 2001-10-31 |
公开(公告)号: | CN1484707A | 公开(公告)日: | 2004-03-24 |
发明(设计)人: | A·N·埃科诺米德斯;A·J·默菲;D·M·瓦伦泽拉;D·弗伦德维;G·D·彦科普洛斯 | 申请(专利权)人: | 里珍纳龙药品有限公司 |
主分类号: | C12N15/90 | 分类号: | C12N15/90;C12N15/11;C12N5/10;A01K67/00 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 | 代理人: | 刘玥 |
地址: | 美国*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | 一种用于工程改造和应用大的DNA载体通过同源重组打靶并且以任何理想的方式修饰真核细胞中的内源基因和染色体座位的方法。这些可供真核细胞用的DNA大打靶载体(称为LTVEC)来源于比那些通过其它方法计划在真核细胞中进行同源打靶常用的DNA片段要大的克隆化基因组DNA片段。也提供检测其中LTVEC准确击中并修饰所需内源基因或染色体座位的真核细胞的快速而简便的方法以及应用这些细胞产生带有所述遗传修饰的生物体。 | ||
搜索关键词: | 修饰 真核细胞 方法 | ||
【主权项】:
1.一种用于遗传修饰真核细胞中的目标内源基因或染色体座位的方法,所述方法包括:a)获得含有目标DNA序列的克隆化基因组大片段;b)应用细菌同源重组遗传修饰(a)的克隆化基因组大片段,以构建可供所述真核细胞用的大打靶载体(LTVEC);c)将(b)的LTVEC导入所述真核细胞中,以修饰所述细胞中的所述内源基因或染色体座位;且d)应用定量分析来检测(c)的真核细胞中的等位基因修饰(MOA),以鉴定其中所述内源基因或染色体座位已被遗传修饰的那些真核细胞。
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