[发明专利]菌根真菌在石斛栽培中的应用

摘要

一种菌根真菌在石斛栽培中的应用技术，所用的小菇属4种真菌分别为石斛小菇(Mycenadendrobii)，紫萁小菇(Mycenosmundicola)，兰小菇(Mycenaorchidicola)，开唇兰小菇(Mycenaanoectochila)；先分别培养菌根真菌和石斛苗，再将菌根真菌与石斛苗共生栽培。采用该项新技术，可大大缩短石斛的生长周期；提高石斛产量和有效成分含量。该项技术栽培方法简单、投资少、不施任何肥料和农药，生产出的石斛为绿色产品。

主权项

1、一种菌根真菌在石斛栽培中的应用技术，采用小菇属4种真菌：石斛小菇(Mycenadendrobii)、紫萁小菇(Mycenaosmundicola)、兰小菇(Mycenaorchidicola)、开唇兰小菇(Mycenaanoectochila)中的任选一种或由其中任意两种或两种以上组成，其主要步骤及条件如下(所涉及的比例均为重量百分比)：(1)菌根真菌的培养将上述的菌根真菌自低温保藏的斜面试管菌种活化后，分别转接于PDA平皿中，于25℃恒温培养12天，分别在菌落边缘打孔成菌片，并以小碎块接入液体培养基进行培养和发酵或接入固体培养基进行培养；其中所述的菌根真菌的液体培养为：培养基的配制：葡萄糖2.5％；KH2PO40.15％；K2HPO40.1％；MgSO40.15％；天然物为麦麸3％(煮汁)，高压灭菌后分别接入上述真菌；培养条件：培养基pH5.6；三角瓶摇床培养瓶装量50％；转速120转/分钟；23℃培养30天；发酵罐培养接种量10％，其余参数同上；发酵培养结束时将发酵物用匀浆机打碎菌体及发酵物备用；其中所述的菌根真菌的固体培养为：培养基的配制：阔叶树锯末∶麦麸∶玉米粒＝1∶1∶0.5，加水量为原料的150-250％，高压灭菌后分别接入上述真菌，待菌丝从培养基顶部长入底部时取出备用；(2)石斛由原球茎到形成苗及其继代培养以1/2MS(MurashigeandSkoog1968)培养基为基本培养基，石斛原球茎增殖时附加萘乙酸(NAA)0.2mg/L、吲哚丁酸(IBA)0.2mg/L、细胞分裂素(KT)0.2mg/L；原球茎分化苗时附加IBA0.5mg/L，KT0.5mg/L；再生植株生长时附加NAA0.5mg/L、IBA0.5mg/L、KT0.2mg/L；苗的继代基本培养基为1/2MS培养基，附加180g/L马铃薯提取液，20g/L蔗糖，8g/L琼脂；(3)菌根真菌与石斛苗共生栽培(a)石斛栽培基质蛭石∶砂子＝4∶1或森林腐殖土∶砂子＝6∶1或泥炭土∶砂子＝5∶1或泥炭土∶砂子∶蛭石＝4∶1∶2；(b)石斛菌根共生栽培在硬质材料的盆中立体栽培，其容器的基部平铺一层石斛栽培基质，其上平铺一薄层小鹅卵石或小碎砖，其缝间用栽培基质填实，按株行距栽培一丛的石斛苗，在苗根的基部放置少量粉碎的湿栎树(山毛榉科Fagaceal)树叶，其上再放以上备好的液体菌根真菌2ml或固体菌根真菌1.5g，使石斛的根与菌接触，用栽培基质将苗覆盖2-3cm厚，浇放置至室温的水；(c)栽培条件采用塑料薄膜温室、玻璃温室、露天栽培遮阳网遮阴，环境温度为18-25℃，光照量为正常日光量的1/3；照度2000Lx；(d)石斛的收获连根取出洗净栽培基质；阴干或60℃以下烘干。