[发明专利]利用水禽制备多株抗体的方法

摘要

本发明涉及一种利用水禽制备多株抗体的方法，其是将蛋鸭经肌肉注射抗原诱发抗体后收取所产鸭蛋，取出蛋黄后经一系列蛋白质纯化步骤再经疏水基胶体层析及透析、脱盐、浓缩等过程再以SDS－丙烯酰胺胶体电泳，分析可得纯度为96％以上之高纯度且不含Fc端的蛋黄免疫球蛋白。经分析，其结果发现此种抗体制备方法不但可制成具高特异性及稀释能力的多株抗体，更可有效避免以往常存在以哺乳类为中间宿主所制成的多株抗体所产生的假阳性反应。

主权项

1、一种自水禽产蛋中纯化多株抗体的方法，其包括：(1)以水为溶剂，自该产蛋的蛋黄中粗分离IgY：可使用自来水、纯水蒸馏水、去离子水，或为pH≥5.1的微酸或含0.05％以下的非离子洗涤剂水溶液或0.15-1.0M食盐水溶液，磷酸盐缓冲液或三羟甲基氨基甲烷缓冲液；(2)添加硫酸铵，使达30-50％的饱和度，或添加硫酸钠，使达14-20％(w/v)的浓度，在其浓度下重复进行盐析；(3)使用含疏水基胶体进行层析IgY：(a)所述的疏水基胶体选自下列物质：丁基琼脂糖、辛基琼脂糖、苯基琼脂糖、烷基琼脂糖、甲基丙烯酸甲酯和甲基丙烯酸丁基酯；(b)层析管柱的操作条件：(i)管柱平衡缓冲液在pH7.0-8.0；(ii)平衡缓冲液为1.0M的硫酸铵或硫酸钠，其电导度为110-200ms/ml；(iii)洗脱方式可用梯度洗脱或单液洗脱：梯度洗脱：A液为前述b(ii)，B液为不带盐的缓冲液，单液洗脱：预先将A液及B液混合并调整其电导度为45-80ms/ml。