[发明专利]酵母重组株及IFNα-la干扰素的纯化方法无效
申请号: | 02108973.6 | 申请日: | 2002-04-16 |
公开(公告)号: | CN1548525A | 公开(公告)日: | 2004-11-24 |
发明(设计)人: | 梁国栋;周鹏;夏中宁 | 申请(专利权)人: | 海南海梁生物高科技有限公司 |
主分类号: | C12N1/19 | 分类号: | C12N1/19;C12N15/20;C12N15/81;C12N15/21;C07K14/56;C07K1/14 |
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地址: | 570216海南省海口*** | 国省代码: | 海南;46 |
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摘要: | 本发明涉及分泌表达α-1a干扰素的酵母工程菌株IFN α-1a/pGAPZ α-A/GS115构建的关键技术、构建结果及利用它来生产α-1a干扰素的纯化方法。本发明采用酵母分泌表达系统取代大肠杆菌包涵体表达系统,目标蛋白α-1a干扰素不需要复性,其生物比活性可达到1.0×109单位/毫克蛋白,低毒副作用;在纯化过程中,不需要价值昂贵的单抗柱,即可从发酵液中提取获得纯度达95%以上的目标蛋白α-1a干扰素,降低了生产成本。 | ||
搜索关键词: | 酵母 重组 ifn la 干扰素 纯化 方法 | ||
【主权项】:
1、一种酵母重组株,其特征在于将克隆修饰的α-1a干扰素基因插入pGAPZα-A之GAP启动子/α-factor信号肽下游位点,删除Kex2(Lys-Arg)位点之后的Ste13位点(Glu-Ala-Glu-Ala)和启始密码子ATG,构建成α-1a干扰素基因分泌型表达载体IFNα-1a/pGAPZα-A,转入毕赤氏酵母(Pichiapastoris)的菌株GS115,构建成分泌型α-1a干扰素的酵母重组株IFNα-1a/pGAPZα-A/GS115。
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