[发明专利]胰岛素的纯化方法无效
申请号: | 02113186.4 | 申请日: | 2002-06-15 |
公开(公告)号: | CN1165549C | 公开(公告)日: | 2004-09-08 |
发明(设计)人: | 罗桂荣;彭淑华;陈慧 | 申请(专利权)人: | 江苏万邦生化医药股份有限公司 |
主分类号: | C07K14/62 | 分类号: | C07K14/62;C07K1/14 |
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地址: | 221004江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种胰岛素的纯化方法,本方法是:胰岛素盐析物→钠盐结晶→锌盐重结晶→收集干燥得胰岛素结晶粉。本发明和单纯钠盐结晶、单纯锌盐结晶相比,具有生产周期短、效价收率高的优点。 | ||
搜索关键词: | 胰岛素 纯化 方法 | ||
【主权项】:
1、一种胰岛素的纯化方法,其特征是该方法是:胰岛素盐析物→钠盐结晶→重结晶→收集干燥得胰岛素结晶粉;所述钠盐结晶的方法是:(a)将胰岛素盐析物,用0.1N稀盐酸溶解成20-30%(W/V)的溶解液;(b)用氢氧化钠溶液对溶解液调PH7.5-8.5,室温搅拌结晶8-10小时;(c)静置,使结晶完全沉下后用离心法或过滤法收集结晶;(d)用2-10%的冷氯化钠溶液洗结晶1-2次,得胰岛素钠盐湿结晶;所述重结晶的方法是:(a)将胰岛素钠盐湿结晶按26-30%(W/W)折成干重,将干重按0.5-2%(W/V)的浓度计算出重结晶的总体积(毫升),按每克干品加入固体柠檬酸1-1.5克,加水溶解成总体积的1/3量;(b)冷室静置10-15小时后过滤,滤液需澄清;(c)向滤液中按1克干品加入浓度为20%醋酸锌溶液1-2ml,冷丙酮16-20ml,再用冷水稀释至总体积,用4N氨水调PH6.0-6.5,慢速搅拌5小时以上使结晶完全,冷室静置至结晶完全沉下;所述收集干燥方法是:吸去上清液,用离心方法收集结晶,再用冷蒸馏水水洗1-2次,然后丙酮、乙醚脱水、以五氧化二磷做干燥剂真空干燥即得胰岛素结晶粉。
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