[发明专利]一种限制性扩增方法无效
申请号: | 02115322.1 | 申请日: | 2002-05-31 |
公开(公告)号: | CN1461809A | 公开(公告)日: | 2003-12-17 |
发明(设计)人: | 马文丽;郑文岭;李凌 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军基因工程研究所 |
主分类号: | C12P19/34 | 分类号: | C12P19/34;C12Q1/68 |
代理公司: | 广州知友专利代理有限公司 | 代理人: | 邵毓琴 |
地址: | 510515 广东省广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种限制性扩增方法,该方法依次包括以下步骤:(1)限制性核酸内切酶消化DNA或cDNA;(2)设计接头,与上述限制性酶切片段连接;(3)根据限制性内切酶位点与接头序列设计通用引物,并针对目标核苷酸序列在通用引物的3′末端延伸一个或一个以上的碱基设计选择性引物进行PCR分组扩增;(4)分离纯化步骤(3)扩增的基因片段作模板,进行二次PCR,纯化产物,重悬于溶液中。本发明可快速、经济、自动化获取大量序列已知、甚至未知的基因片段,用于制备DNA微集芯片(DNAmicrochip)上固化的靶基因片段。 | ||
搜索关键词: | 一种 限制性 扩增 方法 | ||
【主权项】:
1.一种限制性扩增方法,依次包括以下步骤:(1)限制性核酸内切酶消化DNA或cDNA;(2)设计接头,与上述限制性酶切片段连接;(3)根据限制性内切酶位点与接头序列设计通用引物,并针对目标核苷酸序列在通用引物的3′末端延伸一个或一个以上的碱基设计选择性引物进行PCR分组扩增;(4)分离纯化步骤(3)扩增的基因片段作模板,进行二次PCR,纯化产物,重悬于溶液中。
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