[发明专利]从植物中分离提取和纯化奇壬醇的方法及其应用

摘要

本发明涉及一种从植物、特别是从药用植物豨莶草中分离提取和纯化化合物奇壬醇的方法以及该化合物在医药中的应用,以奇壬醇作为先导化合物制成的药剂,具有抗类风湿性关节炎、镇痛、抗菌、抗疟、降压、舒张血管等功效,并具有毒性低、药效明显的优点。

主权项

1.一种从药用植物豨莶草中分离提取和纯化化合物奇壬醇的方法，其特征在于该方法和步骤为：(1)取原料药材豨莶草东方豨莶、腺梗豨莶或毛梗豨莶中的一种或两种或三种，将生药干品或新鲜药材粉碎后，称取干品或新鲜生药，向其中加入石油醚或环己烷，回流提取2-3次，每次回流时间为1-4小时，每次石油醚或环己烷的加入体积升数与生药干品重量公斤数之比＝6-12∶1，或石油醚或环己烷的加入体积升数与新鲜药材重量公斤数之比＝4-8∶1，每次回流后都进行过滤处理，去除回流液，再对滤渣进行下一次回流，最后一次的滤渣待用；(2)用溶媒回流提取或浸泡渗漉提取步骤(1)中得到的滤渣，溶媒可以是30-95％(体积比)乙醇水溶液、氯仿、二氯甲烷、己酸己酯、丙酮、甲醇或含有丙酮40-80％(体积比)的水液；溶媒的加入量按照步骤(1)中加入的原料加入量计算，每次加入溶媒的体积升数∶最初加入干品重量公斤数＝6-12∶1，或溶媒的体积升数∶新鲜药材重量公斤数＝4-8∶1；回流提取的方法是：向滤渣中按比例加入溶媒，反复回流提取2-5次，每次回流时间为1-4小时；浸泡渗漉的方法是：直接用上述溶媒、按上述比例在常温下对滤渣进行1-4次渗漉提取，每次渗漉4-6天；将上述操作得到的提取液过滤，收集滤液；在低于80℃温度下，对滤液进行减压浓缩，除去溶媒，得比重为1.1-1.4的浸膏状提取物A；(3)对步骤(2)中得到的提取物A，先加入水混悬溶解，提取物A的重量公斤数∶水的体积升数＝1∶3-6，然后以溶媒I萃取1-4次，溶媒I是石油醚或包括己烷、环己烷、正己烷在内的C6-C7烷烃，每次水相与溶媒相的体积比＝1∶0.2-2，分离出溶媒层，水层再用溶媒II萃取1-4次，溶媒II是乙酸乙酯或包括二氯甲烷、二氯乙烷、三氯甲烷、四氯化碳在内的卤化烃或包括乙醚在内的醚或包括乙酸丁酯、乙酸戊酯在内的有机酸酯类或C3-C5的脂肪醇，每次水相与溶媒相的体积比例为1∶0.2-3；合并各次萃取后的溶媒II液，得溶媒液B，其中主含奇壬醇；(4)对步骤(3)中收集到的溶媒液B，在低于80℃条件下进行减压浓缩，得到提取固体浓缩物B1；(5)对步骤(4)中得到的提取固体浓缩物B1，用色谱法进行一次或多次的同种或不同种的层析法纯化，或对层析法的产品再进行重结晶纯化，得到奇壬醇纯品；色谱法层析纯化的具体步骤为：取层析柱，用填料装柱，用洗脱液洗脱，收集含奇壬醇的部位，得到纯化了的奇壬醇；对于色谱法中使用的不同填料，采取不同的条件，具体为：1)硅胶层析柱：取常压玻璃层析柱，以60-400目硅胶为填料，提取固体浓缩物B1与硅胶重量份数比在1∶10-1∶300之间，以体积比在1∶0.5-1∶5之间的石油醚和乙酸乙酯的混合溶剂或石油醚和丙酮的混合溶剂为洗脱液，将收集到的含奇壬醇的洗脱液，在低于50℃温度下减压浓缩成固体；2)D101大孔树脂层析柱：取常压玻璃层析柱，以D101大孔树脂为填料，提取固体浓缩物B1与填料的重量份数比在1∶20-1∶200之间，用水洗脱至洗脱流出液无色，然后再依次用体积百分比为10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％的乙醇水溶液进行梯度洗脱，每次洗脱至洗脱流出液无色再增加梯度，收集60％-80％的洗脱流出液，其中主含奇壬醇，再在低于60℃温度下将洗脱流出液减压浓缩成固体；3)中性氧化铝层析柱：取常压或真空玻璃层析柱，以60-300目中性氧化铝为填料，提取固体浓缩物B1与中性氧化铝的重量份数比在1∶20-1∶200之间，以体积比在1∶0.5-1∶5之间的石油醚和乙酸乙酯的混合溶剂或石油醚和丙酮的混合溶剂为梯度洗脱液，即依次以2∶1、1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5的极性梯度增加，进行梯度洗脱，每一梯度洗脱至无样品检出，再增加至下一梯度，收集含奇壬醇的洗脱流出液，控制温度低于60℃，将洗脱流出液减压浓缩成固体；4)聚酰胺层析柱：取常压玻璃层析柱，以60-300目聚酰胺为填料，提取浓缩物B1与聚酰胺的重量份数比在1∶20-1∶200之间，以体积比在1∶1-1∶10之间的石油醚和乙酸乙酯的混合溶剂为梯度洗脱液即依次以1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5、1∶6、1∶7、1∶8、1∶9、1∶10为梯度洗脱液，或以体积比在1∶0.5-10之间的石油醚和丙酮的混合溶剂为梯度洗脱液即依次以2∶1、1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5、1∶6、1∶7、1∶8、1∶9、1∶10的混合液为梯度洗脱液，进行梯度洗脱，每一梯度洗脱至无样品检出，再增加至下一梯度，收集含奇壬醇的洗脱流出液，控制温度低于60℃，将洗脱流出液减压浓缩成固体；5)反相硅胶层析柱：取常压柱或包括Lobar柱在内的制备型加压柱，以100-300目反相硅胶C-18或C-8为填料，提取固体浓缩物B1与反相硅胶C-18或C-8的重量份数比在1∶20-1∶200之间，以体积比在1∶9-4∶1之间的甲醇和水的混合溶剂为洗脱液，收集含奇壬醇的洗脱液，或以体积比在0∶1-1∶0之间的甲醇-水混合液为梯度洗脱液即依次以0∶1、1∶9、2∶8、3∶7、4∶6、5∶5、6∶4、7∶1、8∶2、9∶1、1∶0为梯度洗脱液，进行梯度洗脱，每一梯度洗脱至无样品检出，再增加至下一梯度，收集含奇壬醇的洗脱流出液；然后控制温度低于60℃、将收集到的洗脱流出液减压浓缩成固体；所述的重结晶，就是将色谱法层析纯化后得到的固体，在分析纯级的有机溶媒乙酸乙酯或丙酮或包括乙醇在内的C1-C4醇或水中进行重结晶1-4次，得到奇壬醇结晶纯品。