[发明专利]一种总胆汁酸的测定方法及测定试剂无效
申请号: | 02119402.5 | 申请日: | 2002-05-10 |
公开(公告)号: | CN1378077A | 公开(公告)日: | 2002-11-06 |
发明(设计)人: | 肖洪武 | 申请(专利权)人: | 肖洪武 |
主分类号: | G01N21/25 | 分类号: | G01N21/25;G01N33/52 |
代理公司: | 杭州九洲专利事务所有限公司 | 代理人: | 唐迅 |
地址: | 325011 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种总胆汁酸的测定试剂及测定方法,它是利用3α-羟类固醇脱氢酶及硫代氧化型辅酶(Thio-NAD)特异性氧化胆汁酸,氧化后生成3-酮类固醇、还原型辅酶(NADH)和酮类固醇硫代氧化型辅酶(Thio-NADH),在此,生成的3-酮类固醇在3α-羟类固醇脱氢酶及还原型辅酶(NADH)存在下,又生成胆汁酸及氧化型辅酶(NAD),如此反应循环往复,从而放大微量的胆汁酸量,产生大量的水溶性黄色非染料酮类固醇硫代氧化型辅酶(Thio-NADH),最后测定生成的Thio-NADH的吸光度变化,即测得胆汁酸值。采用本发明来测定总胆汁酸,使用方便、稳定性好、清除干扰明显、灵敏度与现有技术相比可提高20倍左右,对生化仪器管道无污染,使之在对胆汁酸的准确、快速的临床测定中具有十分积极的现实意义。 | ||
搜索关键词: | 一种 胆汁 测定 方法 试剂 | ||
【主权项】:
1、一种总胆汁酸的测定方法,它包括采用3α-羟类固醇脱氢酶,其特征是利用3α-羟类固醇脱氢酶及硫代氧化型辅酶(Thio-NAD)特异性氧化胆汁酸,氧化后生成3-酮类固醇、还原型辅酶(NADH)和酮类固醇硫代氧化型辅酶(Thio-NADH),在此,生成的3-酮类固醇在3α-羟类固醇脱氢酶及还原型辅酶(NADH)存在下,又生成胆汁酸及氧化型辅酶(NAD),如此反应循环往复,从而放大微量的胆汁酸量,产生大量的水溶性黄色非染料酮类固醇硫代氧化型辅酶(Thio-NADH),最后测定生成的Thio-NADH的吸光度变化,即测得胆汁酸值。
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