[发明专利]人甲状旁腺激素基因突变体合成、表达、制备及应用有效
申请号: | 02120821.2 | 申请日: | 2002-06-04 |
公开(公告)号: | CN1465703A | 公开(公告)日: | 2004-01-07 |
发明(设计)人: | 徐明波;王勇波;崔铁民;李亚军;王红丽;袁雪莲;张蕊 | 申请(专利权)人: | 北京双鹭药业股份有限公司 |
主分类号: | C12P21/02 | 分类号: | C12P21/02;C07K14/635;C12N15/12;C12N15/63;A61K38/29;A61P19/10;A61P19/08;A61P3/00 |
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地址: | 100041北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明涉及一种重组人甲状旁腺激素(Parathyriod Hormone,简称PTH)的制备方法。本发明利用遗传密码的兼并性,设计了大肠杆菌偏爱的密码子,降低了DNA序列中的GC含量,合成了PTH的DNA序列。将PCR扩增的人PTH基因与原核表达载体如pET22b组装成高效表达质粒,转化大肠杆菌后用诱导剂诱导PTH基因表达,表达量达到菌体总蛋白的25-30%。工程菌经发酵扩增,破碎后保留上清。上清经处理后,进行离子交换层析和凝胶排阻层析二步法纯化产品。纯品加保护剂后制成药用冻干制剂。该制剂可用于由骨代谢病、骨质疏松所引起的各类疾病的治疗。 | ||
搜索关键词: | 甲状旁腺 激素 基因 突变体 合成 表达 制备 应用 | ||
【主权项】:
1、一种制备人甲状旁腺激素的方法,包括:(1)合成富含A、T的全基因;(2)将(1)得到的基因序列克隆到原核表达载体中;(3)用(2)所述的表达载体转化原核细胞得到工程菌;(4)通过发酵技术扩增(3)中所得到的工程菌,得到人甲状旁腺激素的高水平表达。
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