[发明专利]含脱氢酶生物硅凝胶的制备方法

摘要

本发明公开了一种含脱氢酶生物硅凝胶的制备方法。属于酶的凝胶包埋固定化技术。该方法以酯为前驱体,在酸、碱和无机盐的分步催化作用下,与水发生反应,生成氧化硅溶胶。把该溶胶与溶于缓冲液中一定浓度的酶原溶液混合,在短时间内形成凝胶,静置老化后得到含酶生物凝胶,其特征在于前驱体为正硅酸甲酯、正硅酸乙酯或正硅酸异丙酯,其用量是,与水的摩尔比为0.05－0.10;催化剂为盐酸、硫酸、硝酸、乙酸、氢氧化钠、氨水、磷酸盐、醋酸盐,其用量与正硅酸甲酯、正硅酸乙酯或正硅酸异丙酯的摩尔比为1.0－2.0;水解和缩聚反应温度控制在20－25℃,反应最终pH值控制在7.0。凝胶化时间短,固定化过程简便易行,凝胶平均孔径较大,固定化后酶活性维持率高。

主权项

1一种含脱氢酶生物硅凝胶的制备方法，该方法以酯为前驱体，在酸、碱和无机盐的分步催化作用下，与水发生反应，生成氧化硅溶胶。过程中通过调节pH值来控制水解和缩聚反应的速度，把该溶胶与溶于磷酸盐缓冲液中的浓度为10-100mg/ml的酶原溶液混合，在1分钟之内形成凝胶，静置老化5-7天后得到含酶生物凝胶，其特征在于：前驱体为正硅酸甲酯、正硅酸乙酯或正硅酸异丙酯，其用量是，与水的摩尔比为0.05-0.10；催化剂为盐酸、硫酸、硝酸、乙酸、氢氧化钠、氨水、磷酸盐、醋酸盐，其用量与正硅酸甲酯、正硅酸乙酯或正硅酸异丙酯的摩尔比为1.0-2.0；水解和缩聚反应温度控制在20-25℃，反应最终pH值控制在7.0。