[发明专利]一种限制性荧光标记方法无效
申请号: | 02134540.6 | 申请日: | 2002-08-09 |
公开(公告)号: | CN1473940A | 公开(公告)日: | 2004-02-11 |
发明(设计)人: | 马文丽;郑文岭;李凌 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军基因工程研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12P19/34 |
代理公司: | 广州知友专利代理有限公司 | 代理人: | 邵毓琴 |
地址: | 510515广东省广州*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种限制性荧光标记方法,该方法依次包括以下步骤:(1)以限制性核酸内切酶消化由样品核酸提取纯化后反转录获得的cDNA或者以多对针对多种靶基因而设计的引物进行多重PCR扩增获得的扩增产物,产生许多大小较为一致的限制性基因片段;(2)设计接头,与上述限制性酶切片段连接;(3)根据上述限制性内切酶位点与接头序列设计PCR通用引物,并在上述引物的5′端标记上荧光分子;(4)以荧光标记的通用引物进行PCR扩增样品,该扩增样品经纯化后与DNA芯片杂交。本发明可显著增强杂交信号,并同时显著减少荧光物用量,大大提高芯片检测的灵敏度,尤其适合临床病原体基因的检测芯片。 | ||
搜索关键词: | 一种 限制性 荧光 标记 方法 | ||
【主权项】:
1.一种限制性荧光标记方法,依次包括以下步骤:(1)以限制性核酸内切酶消化由样品核酸提取纯化后反转录获得的cDNA或者以多对针对多种靶基因而设计的引物进行多重PCR扩增获得的扩增产物,产生许多大小较为一致的限制性基因片段;(2)设计接头,与上述限制性酶切片段连接;(3)根据上述限制性内切酶位点与接头序列设计PCR通用引物,并在上述引物的5′端标记上荧光分子;(4)以荧光标记的通用引物进行PCR扩增样品,该扩增样品经纯化后与DNA芯片杂交。
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