[发明专利]抗菌肽AD基因转化酵母发酵生产方法有效
申请号: | 02134570.8 | 申请日: | 2002-08-16 |
公开(公告)号: | CN1173030C | 公开(公告)日: | 2004-10-27 |
发明(设计)人: | 彭中健;杨冠东;杜少平;梁淑娃 | 申请(专利权)人: | 广州市微生物研究所 |
主分类号: | C12N1/19 | 分类号: | C12N1/19;C12N15/12;C12N15/81;C07K14/435 |
代理公司: | 广州粤高专利代理有限公司 | 代理人: | 何燕玲 |
地址: | 510250广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明属于生物发酵领域,涉及一种抗菌肽AD基因转化酵母发酵生产方法,将含抗菌肽AD基因质粒转化的工程酵母在合适的培养基和培养条件下,表达抗菌肽基因并分泌抗菌肽到菌体外,发酵液中抗菌肽的杀菌活力高达7000单位/毫升,该方法生产的抗菌肽酵母制剂杀菌效价高,质量稳定,可大规模生产,生产周期短且成本低。 | ||
搜索关键词: | 抗菌 ad 基因 转化 酵母 发酵 生产 方法 | ||
【主权项】:
1、一种抗菌肽AD基因转化酵母发酵生产方法,把抗菌肽A及抗菌肽D基因克隆到酵母菌里所得到的抗菌肽AD基因转化酵母进行摇瓶培养和发酵罐培养,其特征在于:(1)摇瓶培养:将含抗菌肽AD基因质粒转化的酵母作为菌种接入三角瓶中,在28-32℃,摇床转速150-300转/分的条件下,培养24-72小时;(2)发酵罐培养:将(1)中已培养好的种子接入发酵罐,接种量为2-20%,在28-322,搅拌速度180-400转/分,罐压0.04-0.12兆帕,风量1∶0.5-1∶1.8体积/体积/分,pH6.5-7.5的条件下,培养24-96小时,培养过程中加入1%甲醇诱导,将发酵所得抗菌肽在90-110℃下加热8-20分钟;其中所用的培养基组分及重量百分含量为:酵母粉0.1-3%、蛋白胨0.5-4%、糖0.1-3%,pH6.5-7.5。
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