[发明专利]偃麦草钠离子反向转运蛋白基因及其克隆方法与应用无效
申请号: | 02135545.2 | 申请日: | 2002-09-18 |
公开(公告)号: | CN1408722A | 公开(公告)日: | 2003-04-09 |
发明(设计)人: | 张宪省;乔卫华;李兴国;李全梓 | 申请(专利权)人: | 山东农业大学 |
主分类号: | C07H21/04 | 分类号: | C07H21/04;C12P19/34;C12N15/11;C12N15/29;A01H1/00 |
代理公司: | 济南三达专利事务所 | 代理人: | 孙君 |
地址: | 271018 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明涉及偃麦草中Na+反向转运蛋白ENHX1基因的克隆、重组及耐盐性功能分析,属于分子生物学和生物技术领域。从偃麦草根中提取总RNA,然后将2微克总RNA反转录成cDNA。根据其它植物中的Na+反向转运蛋白中保守的氨基酸序列,设计一对兼并引物,进行常规聚合酶链式反应(PCR),PCR产物连接到pGEM-T载体上,转化DH5α细胞,进行序列测定。然后进行3′和5′末端快速扩增获得全长的cDNA。进一步构建正义表达载体,转化拟南芥。转基因拟南芥具较高的耐盐性。因此,该基因转化小麦、水稻、玉米等作物,将会提高这些植物的耐盐性,将使得这些植物可以在盐碱地上种植,具有非常重要的经济效益和社会效益。 | ||
搜索关键词: | 麦草 钠离子 反向 转运 蛋白 基因 及其 克隆 方法 应用 | ||
【主权项】:
1.一种克隆的偃麦草Na+反向转运蛋白基因ENHX1,其特征在于它具有SEQINNO1所示的序列,(a)序列特征*长度:1955碱基对*类型:核酸*链型:双链*拓扑结构:线性(b)分子类型:cDNA(c)假设:否(d)反义:否(e)最初来源:偃麦草(f)序列描述:SEQINNO.11ATCCGCCGAGGTGGCGACCGGCATGGGGCTCGATTTGGGAGCCATCGCTCTCAAGTACAC-6061GGGGCTGGCGGTGTCGGACCACGGCTCCATCGTCGCCATCAACATCTTCATCGCGCTGCT-120121CTGCGGCTGCATTGTCTTCGGCCACCTGCTCGAGGGGAACCGCTGGGTCAATGAGTCCAC-180181CACCGCGCTTGTCCTGGGGCTCATCACCGGTGGTGTGATTCTGATCTGCTCCAAAGGGGT-240241GAATTCGCGCATCCTTATCTTCAGCGAGGATATTTTCTTCATCTACTTGCTCCCGCCCAT-300301CATTTTTAACGCCGGGTTTCAAGTAAAGAAAAAGCAATTCTTCCGCAACTTTGCGACAAT-360361TATTTTATTTGGTGCTGCTGGAACATTGATATCCTTTGTAATAATCACGTTCGGTGCTAT-420421GGGATTGTTCAGCAAACTTGGTGTTGGTCCACTCGAGCTTGGGGACTATCTTGCAATTGG-480481GGCTATCTTCTCAGCAACAGATTCTGTTTGCACCTTACGGGTGCTTAACCAGGATGAAGC-540541ACCCCTACTCTATAGTCTAGTTTTTGGTGAAGGTGTTGTTAATGATGCTACATCAGTTGT-600601GCTCTTCAATGCAATTCAAAACATTGATATTAATCATTTTGATGTCTTTGTTCTACTACA-660661ATTCATTGGAAAATTCCTCTACCTATTCTTCACCAGCACCGTTCTTGGAGTAGCTGCTGG-720721GTTGCTTAGTGCATACATTATTAAGAAACTTTGTTCTGCAAGACACTCAACTGACAGAGA-780781AGTTGCTATCATGATACTCATGGCATACCTTTCGTATATGCTGTCAATGTTGCTGGATCT-840841GAGTGGCATTCTAACTGTGTTCTTCTGTGGAATAGTAATGTCACATTACACTTGGCATAA-900901TGTCACAGAAAGCTCAAGGGTTACTACCAAGCATACTTTTGCAACTTTATCACTTATTGC-960961TGAGATTTTTCTTTTTCTCTATGTCGGGATGGATGCATTGGACATTGATAAATGGAAATT-10201021AGCTAGTAGCAGTCCTAAGAAACCAATTGCTTTAAGCGCTGTTATATTGGGTTTGGTTAT-10801081GGTTGGAAGAGCAGCATTCGTATTCCCTTTATCTTTTCTATCGAACTTAAGTAAAAAGGA-11401141GTCACACCCAAAGATTTCCTTCAACCAACAGGTTATCATCTGGTGGGCAGGTCTCATGAG-12001201AGGAGCAGTTTCAATTGCACTTGCTTATAACAAGTTTACAACATCTGGTCATACTGCCGT-12601261GCGAGTTAATGCTGTCATGATCACGAGCACAATCATTGTTGTTCTGTTCAGCACAATGGT-13201321TTTCGGCTTGCTGACTAAGCCTCTGATTAATCTCCTCATCCCACCAAGACCTGGCACTGC-13801381AGCTGATATCTCGAGCCAGTCATTCCTAGACCCACTTACGGCGAGCTTGTTGGGATCGGA-14401441CTTCGATGTAGGCCAGCTCACCCCTCAAACAAACCTTCAGTATCTTCTCACCATGCCAAC-15001501TCGCTCGGTTCATCGTGTATGGCGCAAGTTCGATGATAAGTTCATGCGCCCAATGTTTGG-15601561GGGAAGAGGCTTCGTCCCATTTGTGCCTGGTTCACCCATAGAGAGGAGCGTCCATGGGCC-16201621TGGCTTGTTGGGCACTGTGACGGAGGCAGAAGACCGTAGTTAAGTTGAAGCCCAGAAGGT-16801681GCAAGTGTATTTCTGTAAATGCTCAGATATCACTCAGTTTTGCTCTTGGGATTCTTTCGG-17401741TGTATTATCGCTATTTGTTGGTGTATATTGTGCAGATAGTTTCTACAGGACCATGTACGC-18001801TGTGTAGAGTTTTGGGAGCCATTCAAGATGTACAATTAATCTGTAAATTAATTTCGTTCT-18601861TGTTCAGACAGAACAATCAGATGCTGGATATTAGCATTCATGTATAAAAGGAACTCAGGT-19201921GGATAACTAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA-1955
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