[发明专利]家蝇防御素基因及其克隆方法与重组应用

摘要

家蝇防御素cDNA及其克隆方法与重组应用，属于生物基因工程技术领域。家蝇防御素具有SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示的序列。本发明的克隆方法是，从家蝇中提取总RNA或mRNA，反转录合成cDNA；根据防御素的保守序列设计引物，通过链式聚合酶反应扩增到一个DNA片段；将扩增产物纯化，取纯化产物克隆到pGEM－TEasy载体，转化DH5α细胞，平板过夜培养。本发明家蝇防御素，通过基因重组技术在大肠杆菌和酵母菌中进行表达，获得有抗菌功能的家蝇防御素，用于医药产品生产；将家蝇防御素cDNA通过现有技术基因工程方法，转入动物和植物体内，增加其抗病性，用于生产。

主权项

1.一种克隆家蝇防御素cDNA，其特征在于，具有如下序列：(1)SEQIDNO1的信息(g)序列特征：*长度：358碱基对*类型：核酸*链型：双链*拓扑结构：线性(h)分子类型：DNA(i)假设：否(j)反义：否(k)最初来源：家蝇(Muscadomestica)(l)序列描述：SEQIDNO.1atgaaatattttacaatgttcgcttttttctttgtggccgtctgttacatcagccagtcg60agtgcctcacctgcccccaaagaagaggcaaatttcgtccatggagctgacgcccttaag120cagttggagcctgagttacatggccgttataagagagctacttgcgatttgttgagcggt180actggtgttggccactcggcctgcgctgcccattgtctgttgcgcggcaaccgtggaggc240tactgcaatggcaaaggtgtttgtgtttgccgtaactgaggtgttgttttttgttattgt300agtttataaggaagttaacaagatgtattattgtatgtaataaattaaaaaaaaaaaa358(2)SEQIDNO.2的信息(b)序列特征*长度：92氨基酸*类型：氨基酸*链型：单链*拓扑结构：线性(b)分子类型：肽(c)序列描述MetLysTyrPheThrMetPheAlaPhePhePheValAlaValCys151015TyrIleSerGlnSerSerAlaSerProAlaProLysGluGluAla202530AsnPheValHisGlyAlaAspAlaLeuLysGlnLeuGluProGlu354045LeuHisGlyArgTyrLysArgAlaThrCysAspLeuLeuSerGly505560ThrGlyValGlyHisSerAlaCysAlaAlaHisCysLeuLeuArg657075GlyAsnArgGlyGlyTyrCysAsnGlyLysGlyValCysValCys808590ArgAsn