[发明专利]细胞测试体系及构建方法和用途无效
申请号: | 02136218.1 | 申请日: | 2002-07-24 |
公开(公告)号: | CN1414108A | 公开(公告)日: | 2003-04-30 |
发明(设计)人: | 阎东升;董伟;谈学海;胡咏武;汪建 | 申请(专利权)人: | 杭州华大基因研发中心 |
主分类号: | C12Q1/00 | 分类号: | C12Q1/00;C12Q1/68 |
代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司 | 代理人: | 张法高 |
地址: | 310007 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种细胞测试体系及构建方法和用途。细胞测试体系是CHO-K1/d2EGFP和HEK-293/d2EGFP细胞系,并且其中包含由4xCRE和HSV-TK的DNA序列所构建的4xCRE-d2EGFP质粒。细胞测试体系构建方法是设计4xCRE-HSV-TK序列,人工合成相应的寡核苷酸;以该寡核苷酸为模板,设计引物进行PCR扩增并克隆到d2EGFP载体上;测序鉴定连接产物,挑选出正确的重组质粒,将质粒转入CHO-K1和HEK-293细胞中;用G418抗生素筛选抗性克隆并进行功能测试。细胞测试体系的用途是用于筛选与cAMP信号传导途径相互作用的化合物。本发明的优点是灵敏度高,特异性强,检测方便,经济,易于观察,可应用于大规模药物筛选,缩短药物研发周期,减少研发费用。 | ||
搜索关键词: | 细胞 测试 体系 构建 方法 用途 | ||
【主权项】:
1.一种细胞测试体系,其特征在于它是CHO-K1/d2EGFP和HEK-293/d2EGFP细胞系,并且其中包含由4xCRE和HSV-TK的DNA序列所构建的4xCRE-d2EGFP质粒。
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