[发明专利]用阴离子交换树脂从核糖核酸酶解液中分离核苷酸的方法

摘要

用阴离子交换树脂从核糖核酸酶解液中分离核苷酸的方法。本发明通过阴离子交换树脂和炭柱的有序排列组合，一次分离纯化得到高纯度单核苷酸。本发明的方法可高收率、高浓度地获得5’－AMP、5’－GMP、5′－CMP和5′－UMP四种核苷酸，分离总收率可达90％，酶解液中的大部分杂质被截留在阴离子交换树脂中，或被分离时洗脱掉。本发明方法，具有树脂用量少、成本低、收率高、分离效果好、所得产品纯度高以及适合大规模工业化生产等优点。

主权项

1.用阴离子交换树脂从核糖核酸酶解液中分离核苷酸的方法，其特征在于依次包括如下步骤：①将含有四种5’-核苷酸的酶解液按序流过两根强碱阴离子交换树脂柱、使4种5’-核苷酸被吸附在两根强碱阴离子交换树脂柱中；②用酸性溶液洗涤强碱阴离子交换树脂柱，洗脱液流入第一炭柱，使其中的5′-CMP吸附于第一炭柱中，然后用碱性醇溶液洗脱第一炭柱，收集洗脱液，收集5′-CMP溶液；③用较强酸性溶液洗涤强碱阴离子交换树脂柱，洗脱液流入第二炭柱，使其中的5′-AMP吸附于第二炭柱，然后用碱溶液洗脱，收集5′-AMP溶液；④用较强酸性和盐溶液洗涤强碱阴离子交换树脂柱，洗脱液流入第三炭柱，使其中的5′-UMP吸附于第三炭柱，然后用碱溶液洗脱，收集5′-UMP溶液；⑤用离子强度更强的溶液洗涤阴离子交换树脂，洗脱液流入第四炭柱，使其中的5′-GMP吸附于第四炭，然后用碱性溶液洗脱，收集5′-GMP溶液。