[发明专利]一种活性茯苓多糖的制备方法

摘要

本发明涉及一种活性茯苓多糖的制备方法，用深层发酵法对茯苓菌种进行菌丝体培养，经繁殖、发酵、提取、精制等工艺步骤制得。与现有工艺相比，本发明工艺无需经过氧化及羧甲基化等化学处理，大大降低了加工成本。所得到的产品除具备现有工艺产品的抗肿瘤作用外，还适用于抗花粉过敏及改善肾功能。

主权项

1.一种活性茯苓多糖的制备方法，其特征在于，该方法采用生物发酵工艺，其工艺步骤如下：a.菌种培养：取用液氮保存的茯苓菌种，移植在PDA斜面培养基上，在28℃～32℃温度下培育10～15天，得到培养好的茯苓菌种；b.菌丝体的发酵制备：采用三级通气发酵法，生产周期60～72小时，具体工艺流程如下：取步骤a中茯苓菌种的菌丝体，移入有液体培养基的三角烧瓶中，在20～30℃温度下往复振荡5～7天，往复振荡的冲程4～10cm，振荡频率100～120rpm，接种量5％(v/v)；将摇瓶培养物合并，移入种子罐中，罐内装料70％(v/v)，接种量10％(v/v)，搅拌速度200～250rpm，通气量1∶0.4v/vmin，罐压0.4×105Pa，28～30℃温度下通气培养36～60小时后移入繁殖罐；繁殖罐菌丝体长浓后，再以1∶10的体积比扩大繁殖到发酵罐；发酵罐罐温为28～32℃，通气量1∶1(v/v)，搅拌速度100～200rpm，发酵罐繁殖60～72小时后，酵液经板框压滤，得菌丝体滤饼；c.茯苓多糖的提取：将步骤b制得的滤饼加水10倍后，用细胞捣碎机打碎细胞，然后加沸水回流浸取3～5小时，得到浸取液；将浸取液再经真空薄膜浓缩，取1份浓缩液加3倍体积95％(重量％)乙醇，在0～4℃条件下醇析8小时，取醇析物喷雾干燥，即得褐色粉末状的活性茯苓多糖提取物；或者将浸取液过超滤膜，收集滤液，经喷雾干燥，即得褐色粉末状的活性茯苓多糖提取物。