[发明专利]基因特异性抗体的亲和纯化方法无效
| 申请号： | 02137509.7 | 申请日： | 2002-10-18 |
| 公开（公告）号： | CN1490334A | 公开（公告）日： | 2004-04-21 |
| 发明（设计）人： | 缪金明 | 申请（专利权）人： | 缪金明 |
| 主分类号： | C07K16/18 | 分类号： | C07K16/18;C07K1/16;C12N15/79 |
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| 地址： | 201204上海市浦*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明是一种涉及亲和纯化基因免疫所产生的特异性抗体的方法，该方法将带有特定基因和6×His的真核细胞表达质粒免疫动物，制备含有基因特异性抗体(IgG)的血清或卵黄免疫球蛋白(IgY)粗提物；将该质粒在体外转染真核细胞，培养后将细胞裂解液加到金属离子螯合树脂柱，由于重组蛋白带有6×His片段，可以与树脂中的金属离子螯合，被吸附于树脂表面，制成亲和层析柱；在进行特异抗体亲和层析时，将含有基因特异性抗体(IgG)的血清或卵黄免疫球蛋白(IgY)粗提物加到亲和层析柱，基因特异性抗体与相应的抗原重组蛋白充分结合后，先洗掉非特异性的抗体和杂蛋白，最后洗柱收集基因特异性的抗体。该方法纯化的抗体将消除目前多克隆抗体(IgG或IgY)纯度低所产生的交叉结合现象。 | ||
| 搜索关键词： | 基因 特异性 抗体 亲和 纯化 方法 | ||
【主权项】：
1.一种亲和纯化基因免疫所产生的特异性抗体的方法，该方法包括：a)将带有特定基因和6×His的真核细胞表达质粒免疫动物，产生含有基因特异性抗体的血清或卵黄免疫球蛋白粗提物；b)将该质粒在体外转染真核细胞或制备原核表达质粒转化原核细胞，培养后将细胞裂解液加到金属离子螯合树脂柱，由于重组蛋白带有6×His片段，可以与树脂中的金属离子螯合，被吸附于树脂表面，制成亲和层析柱；c)在进行特异抗体亲和层析时，将含有基因特异性抗体的血清或卵黄免疫球蛋白粗提物加到亲和层析柱，特异性抗体与相应的抗原重组蛋白充分结合后，先洗掉非特异性的抗体和杂蛋白，最后洗柱收集基因特异性的抗体。
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