[发明专利]组织工程全层皮肤的制备方法

摘要

一种组织工程全层皮肤的制备方法，属于一种可以移植的含活细胞基质的全层人工皮肤制备领域。它包括胶原凝胶的准备、防止胶原凝胶的收缩、全层皮肤的培养和真皮、表皮分离后用胶原酶的消化。通过本发明制备的全层皮肤在组织学结构和超微结构等方面都比现有人工皮肤更接近于天然皮肤，可以直接应用于多种类型如烧伤、溃疡、创伤、畸形、术后缺损和疤痕等皮肤的修复和愈合。

主权项

1、一种组织工程全层皮肤的制备方法，包括将原料的表皮和真皮分离、细胞的三维培养，其特征是：1.1准备胶原溶液：在无菌条件下将复合胶原溶于0.1％的醋酸中，再用紫外线照射胶原溶液；1.2防止胶原凝胶收缩：将无菌尼龙膜置入培养板孔中，用1.1所述的复合胶原溶液浸湿放孵箱中使其固化，再把尼龙膜浸入含戊二醛的磷酸钠盐缓冲液(PBS，下同)内放置，并用该溶液冲洗和用成纤维细胞培养液冲洗，之后置于最低必须培养液(DMEM，下同)中进行培养；1.3细胞的三维培养：将无菌尼龙膜置入培养皿内滴加胶原溶液固化，再把尼龙膜浸入含1％戊二醛的PBS中，待后用成纤维细胞培养液冲洗，然后置于成纤维细胞培养液中静置；再将尼龙膜放在培养皿中，准备胶原溶液，用紫外线照射后加入DMEM和胎牛血清(FBS，下同)用NaOH中和混合，加入成纤维细胞悬液后放入孵箱内固化，然后加入成纤维细胞培养液培养；1.4真皮、表皮分离后用胶原酶消化真皮组织。