[发明专利]突变的青霉素扩环酶及用其制备7－氨基去乙酰氧基头胞菌素酸的方法

摘要

本发明提供对青霉素G具有更高活性的突变扩环酶(expandase)，以用于制备7－氨基去乙酰氧基头胞菌素酸(7－aminodeacetoxycephalosporanicacid，7－ADCA)，该突变的扩环酶包括在一或多个对应于野生型扩环酶之残基位置的氨基酸置换，其系选自甲硫氨酸73、甘氨酸79、缬氨酸275、亮氨酸277、半胱氨酸281、甘氨酸300、天冬酰胺304、异亮氨酸305、苏氨酸91、丙氨酸106、半胱氨酸155、酪氨酸184、甲硫氨酸188及组氨酸244所组成之组，但在天冬酰胺304之残基位置不是N304L以及在半胱氨酸155之残基位置为C155Y，且该氨基酸置换至少含有一或多个选自苏氨酸91、丙氨酸106、半胱氨酸155、酪氨酸184、甲硫氨酸188、组氨酸244及L277Q所组成之组。

主权项

1.突变的青霉素扩环酶，其包括在一或多个对应于野生型扩环酶之残基位置的氨基酸置换，其选自甲硫氨酸73、甘氨酸79、缬氨酸275、亮氨酸277、半胱氨酸281、甘氨酸300、天冬酰胺304、异亮氨酸305、苏氨酸91、丙氨酸106、半胱氨酸155、酪氨酸184、甲硫氨酸188和组氨酸244，但在天冬酰胺304之残基位置不是N304L以及在半胱氨酸155之残基位置为C155Y，且该氨基酸置换至少含有一或多个选自苏氨酸91、丙氨酸106、半胱氨酸155、酪氨酸184、甲硫氨酸188、组氨酸244和L277Q。