[发明专利]一种纯化血红蛋白的方法

摘要

本发明提供了一种纯化血红蛋白的方法。本方法采用扩张床吸附技术，以自下而上的进料方式使层析介质膨胀扩张，细胞碎片、杂蛋白等杂质直接通过床层，血红蛋白被介质吸附，实现从人或牛、猪、羊等动物的血红细胞裂解液中直接纯化血红蛋白。该技术省去离心或过滤去除碎片步骤，仅一步操作产品即达电泳纯，操作时间短，提取收率高，产品活性损失小，是一种简捷、高效、适合工业化生产的天然血红蛋白制备方法。

主权项

1.一种纯化血红蛋白的方法，包括如下步骤：(1)床层平衡：用pH值为5.0～8.0的平衡液缓冲液以2～5cm/min-1 的线流速自下而上平衡扩张床吸附介质，直至扩张床层稳定后；其中扩张床吸附介质为粒径分布在50～300μm之间的阳离子交换介质或金属亲和层析介质；(2)进料吸附：将红细胞裂解液pH值调成5.0～8.0，以2～5cm/min-1的线流速自下而上进料，进料过程中注意保持适当高度和空隙率；(3)淋洗：进料完毕后，保持床层扩张状态，用pH值为5.0～8.0的平衡液缓冲液以2～5cm/min-1的线流速自下而上洗去滞留在床层中未结合的蛋白、细胞碎片等杂质和其它与介质结合不牢的物质；(4)改变pH值洗脱：将床层改为固定床操作，在2～20℃温度情况下，用pH值为6.0-8.0的平衡缓冲液以2～5cm/min-1的线流速自上而下流过床层，收集样品，整个纯化过程控制在2-20℃。