[发明专利]利用转化柠檬酸合成酶基因培育磷高效水稻的方法

摘要

本发明公开了一种利用转基因技术培育磷高效水稻的方法，属于基因工程和植物新品种选育技术领域。其特征在于：将来源于细菌的柠檬酸合成酶基因(Citrate synthase，CS)导入水稻受体，借助报告基因、聚合酶链式反应(PCR)检测和分子杂交鉴定出转基因植株，考查后代植株对土壤无效磷的吸收情况和农艺性状，选育分蘖数明显增多、产量有较大提高、耐低磷的转基因水稻株系，进而培育磷高效水稻品种和创造育种新资源。

主权项

1、一种培育磷高效水稻的方法，其特征在于：a.利用聚合酶链式反应(PCR)的方法从假单孢杆菌(Pseudomonas aeruginosa)中克隆柠檬酸合成酶(Citrate synthase，CS)基因的编码序列；b.通过基因工程的方法构建适合于在植物中表达的重组基因的表达载体；c.利用转基因方法将外源柠檬酸合成酶基因导入水稻受体，获得转化植株；d.借助报告基因和PCR方法鉴定阳性转化株，进一步用分子杂交方法鉴定阳性转化株的整合拷贝数，将含1至少数几个拷贝的转化株自交结实，分单株收种；e.对上季选留的种子进行磷胁迫种植，挑选有希望的株系，利用PCR方法鉴定阳性单株，自交留种；f.对收获的种子进行磷胁迫种植，进一步考察其耐低磷的能力和农艺性状，从表型稳定、耐低磷及农艺性状有较大改善的2-3个株系中选择其纯合的单株；g.进一步培育成新品系或育种新资源。