[发明专利]力达霉素与单克隆抗体及其Fab'片段的偶联物以及在结肠癌等肿瘤靶向治疗中的应用

摘要

本发明涉及力达霉素与单克隆抗体及其Fab’片段的偶联物以及在结肠癌等肿瘤靶向治疗中的应用，抗IV型胶原酶单抗3G11及其Fab’片段，以2－亚胺基四氢噻吩(2－IT)和N－羟基琥珀酰亚胺基－间－(N－马来酰亚胺基)苯甲酸酯(MBS)或其它交联剂分子作为中介体，分别与力达霉素(LDM)偶联，获得了单抗3G11－LDM偶联物和Fab’－LDM偶联物，以单抗3G11对人的结肠癌、肺癌、食管癌、胃癌和乳腺癌恶性肿瘤进行免疫组织化学染色，显示IV型胶原酶在上述消化道肿瘤中的表达和活性增加，间接ELISA方法测定单抗3G11及其Fab’片段与人结肠癌HT－29、肺癌PG、鳞癌KB、鼠结肠癌26(C26)和肝癌22(H22)均有较强的免疫结合能力，单抗3G11对移植于裸鼠的人FG肺癌可产生清晰的免疫显像，体内实验用于治疗小鼠结肠癌与肝癌，单抗3G11－LDM偶联物和Fab’－LDM偶联物均显示出比同等剂量的游离LDM更强的肿瘤生长抑制作用，因此，3G11－LDM偶联物和Fab’－LDM偶联物可能用于结肠癌等恶性肿瘤的靶向治疗。

主权项

1.力达霉素(LDM)与抗IV型胶原酶单克隆抗体3G11及其Fab’片段构成的免疫偶联物，其特征在于单抗3G11-LDM偶联物或Fab’-LDM偶联物是分别由单抗3G11蛋白分子上的氨基或Fab’片段上的巯基与LDM辅基蛋白分子上的氨基之间通过小分子交联剂作为接头形成的，单抗3G11或Fab’与LDM免疫偶联物的分子比为1∶1，其中用于连接LDM与单抗3G11或Fab’的小分子接头可以是2-亚胺基四氢噻吩(2-IT)和N-羟基琥珀酰亚胺基-间-(N-马来酰亚胺基)苯甲酸酯(MBS)，也可以是N-羟基琥珀酰亚胺基-3-(2-吡啶二硫基)-丙酸酯(SPDP)等其它小分子异型双功能交联剂。