[发明专利]蚯蚓纤溶酶多种组分及其分离、纯化、制备工艺无效
申请号: | 02153848.4 | 申请日: | 2002-12-05 |
公开(公告)号: | CN1504568A | 公开(公告)日: | 2004-06-16 |
发明(设计)人: | 王锋;望超;李梅;张季平;桂璐璐;常文瑞 | 申请(专利权)人: | 中国科学院生物物理研究所 |
主分类号: | C12N9/68 | 分类号: | C12N9/68;C07K1/18 |
代理公司: | 北京北新智诚知识产权代理有限公司 | 代理人: | 张爱群 |
地址: | 100101*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了蚯蚓纤溶酶多种组分及其分离、纯化、制备工艺,该工艺包括(1)粗分离:蚓激酶粗品过阴离子交换层析柱,得到三个活性峰,D1,D2,D3;(2)精细纯化:D1过阴离子交换层析柱,得到三个活性峰,每个活性峰分别过疏水层析柱得到纯品:EFE-f,EFE-e,EFE-d;D2过疏水层析柱,收集活性峰过阴离子交换层析柱纯化,得到活性组分EFF-a纯品;D3过疏水层析柱得到两个活性峰:D3H1、D3H2,将D3H1过阴离子交换层析柱纯化,得到活性组分EFE-b和EFE-c纯品;将D3H2过疏水层析柱收集活性峰,得到活性组分EFE-g的纯品。本发明的优点是:能系统地获得纯度和活性都较高的蚯蚓纤溶酶的七个组分,可满足实验室规模的制备,经适当放大可适应生产规模的制备。 | ||
搜索关键词: | 蚯蚓 纤溶酶 多种 组分 及其 分离 纯化 制备 工艺 | ||
【主权项】:
1、蚯蚓纤溶酶多种组分的分离、纯化、制备工艺,其特征在于该工艺包括如下步骤:(1)粗分离:溶解蚓激酶粗品,用阴离子交换层析柱进行粗分离,得到三个活性峰,D1,D2,D3;(2)精细纯化:D1过阴离子交换层析柱,得到三个活性峰:D1RQ1,D1RQ2,D1RQ3,每个活性峰分别过疏水层析柱得到纯品:D1RQ1H即EFE-f,D1RQ2H即EFE-e,D1RQ3H即EFE-d;D2过疏水层析柱,收集活性峰过阴离子交换层析柱纯化,得到一活性组分纯品,即EFE-a;D3过疏水层析柱得到两个活性峰:D3H1、D3H2,将D3H1过阴离子交换层析柱纯化,得到两个活性组分纯品:D3H1M1即EFE-b,D3H1M2即EFE-c;将D3H2过疏水层析柱收集活性峰,得到一活性组分的纯品D3H2P1即EFE-g。
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