[发明专利]新型噬菌粒展示载体pCANTAB5L无效
申请号: | 02155025.5 | 申请日: | 2002-12-19 |
公开(公告)号: | CN1508254A | 公开(公告)日: | 2004-06-30 |
发明(设计)人: | 潘卫;沈毅君;刘彦君;戚中田 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军第二军医大学;上海复旦张江生物医药股份有限公司 |
主分类号: | C12N15/63 | 分类号: | C12N15/63;C12N15/66;C12N15/70 |
代理公司: | 上海新天专利代理有限公司 | 代理人: | 衷诚宣 |
地址: | 200433*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及生物工程技术领域,是一种应用于噬菌体展示外源随机多肽的新型噬菌粒展示载体pCANTAB5L。该载体通过在pCANTAB5X的SfiI和NotI酶切位点之间插入衔接片段Xba I-Stu I-Sal I-Kpn I-[G4S]3-Not I而获得。该载体由于提供了Sfi I,Xba I,Stu I,Sal I和Kpn I 5个常用内切酶克隆位点,故方便了外源基因的定向克隆,提高了克隆效率,有利于扩大噬菌体展示肽库库容量;又由于在噬菌体PIII蛋白基因和外源展示蛋白基因之间引入了由15个氨基酸组成的柔性多肽接头基因[G4S]3,并在该基因中适当使用了大肠杆菌稀有密码子,从而降低了所展示的外源蛋白与PIII蛋白之间的相互干扰,保持了外源蛋白和PIII蛋白的功能与活性。本发明适用于展示各种随机肽库、功能靶蛋白、功能靶蛋白变异体库和大分子量(>300个氨基酸)功能蛋白。 | ||
搜索关键词: | 新型 噬菌粒 展示 载体 pcantab5l | ||
【主权项】:
1.一种噬菌粒展示载体,其特征在于在噬菌粒pCANTAB5X的Sfi I和Not I酶切位点之间插入了含Xba I、Stu I、Sal I和Kpn I酶切位点的核苷酸片段,插入片段的核苷酸序列为TCTAGAGGCCTGTCGACGGTACC。
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