[发明专利]抗乙肝病毒表面抗原的人源单克隆抗体的制备方法无效
| 申请号： | 02156869.3 | 申请日： | 2002-12-19 |
| 公开（公告）号： | CN1421531A | 公开（公告）日： | 2003-06-04 |
| 发明（设计）人： | 胡显文;高丽华;陈惠鹏;胥照平;李世崇;陈昭烈 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军军事医学科学院生物工程研究所 |
| 主分类号： | C12P21/08 | 分类号： | C12P21/08;C12N5/16;A61P1/16;A61P31/12 |
| 代理公司： | 北京北新智诚专利代理有限公司 | 代理人： | 张爱群 |
| 地址： | 100071*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明建立了分泌抗乙肝表面抗原的人源单克隆抗体的人－鼠杂交瘤和人－人杂交瘤的制备方法。采用体外模拟人体抗原递呈加工过程，以及采用SCID小鼠建立人体免疫系统的方法，获得乙肝表面抗原特异性的人B细胞，将B细胞与人骨髓瘤细胞或鼠骨髓瘤细胞融合，利用ELISA方法判断阳性克隆，不断筛选和克隆抗乙肝表面抗原的人源单克隆抗体的杂交瘤细胞系。经多孔微载体培养杂交瘤细胞，可获得抗乙肝表面抗原的人源单克隆抗体，这类单抗可用于乙型肝炎的预防和治疗。 | ||
| 搜索关键词： | 乙肝病毒 表面抗原 单克隆抗体 制备 方法 | ||
【主权项】：
1、抗乙肝病毒表面抗原的人源单克隆抗体的制备方法，其特征在于该方法包括以下步骤：(1)乙肝表面抗体阳性的健康人外周血单个核细胞的分离；(2)乙肝表面抗体阳性的健康人外周血单个核细胞的的体外培养；(3)乙肝表面抗体阳性的健康人外周血单个核细胞培养增殖后B细胞和T细胞的分离；(4)用SCID鼠体内培养乙肝表面抗体阳性的健康人外周血单个核细胞；(5)收集含表达乙肝表面抗体的人B细胞，与人骨髓瘤细胞SP2或小鼠骨髓瘤细胞NS-1、SP2/0融合；(6)选择性培养基培养筛选杂交细胞，检测筛选阳性细胞，克隆化培养，进一步克隆筛选阳性细胞，阳性克隆扩增与冻存，单克隆抗体性质的鉴定；(7)培养杂交瘤细胞；(8)收集细胞培养上清，用亲和层析柱纯化上清中的抗乙肝表面抗原的人源单克隆抗体。
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