[发明专利]一种基于芯片的反义寡核苷酸筛选方法及其用途无效
| 申请号： | 02159415.5 | 申请日： | 2002-12-31 |
| 公开（公告）号： | CN1511957A | 公开（公告）日： | 2004-07-14 |
| 发明（设计）人： | 王升启;刘韧;陈忠斌;王丹;孙偶军;李慎菁 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军军事医学科学院放射医学研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 1008*** | 国省代码： | 北京;11 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明涉及一种生物工程类检测技术及其用途。具体说是将合成并修饰的靶向特定基因的寡核苷酸固定于化学修饰的固相载体上制备成基因芯片，与放射性同位素或非放射性分子标记的信使核糖核酸(mRNA)模板杂交，杂交结束后洗去杂交液并晾干，加入RNase H切割，对照区只加缓冲液不加酶，一定时间后洗涤、晾干并进行检测，分析各序列结合强度及RNase H切割活性，以RNase H切割前/切割后的比值进行排序，理论上比值越大的序列其结合活性和RNase H切割活性越好，优化出具有RNase H激活活性的结合靶点序列、最佳寡核苷酸长度及其修饰方法。从上述优化的序列中选出最佳寡核苷酸序列，(1)通过体内外活性评价进一步确定其生物活性，获得寡核苷酸候选药物；(2)作为疾病诊断的探针；(3)作为基因功能研究的工具。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 芯片 反义 寡核苷酸 筛选 方法 及其 用途 | ||
【主权项】：
1.本发明涉及一种新的基于芯片杂交和原位RNase H切割的反义寡核苷酸筛选方法，其特征在于，通过将合成并修饰的靶向特定基因的寡核苷酸固定于化学修饰的固相载体上制备成基因芯片，与放射性同位素或非放射性分子标记的信使核糖核酸(mRNA)模板进行杂交，杂交结束后洗去杂交液并晾干，加入RNase H进行切割，对照区只加缓冲液不加酶，一定时间后洗涤、晾干并进行信号检测扫描，分析各序列结合靶mRNA强度及RNase H切割活性，以RNase H切割前/切割后的比值进行排序，理论上比值越大的序列其结合活性和RNase H切割活性越好，从而优化出具有RNase H激活活性的结合靶点序列、最佳寡核苷酸长度及其修饰方法。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国人民解放军军事医学科学院放射医学研究所，未经中国人民解放军军事医学科学院放射医学研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/02159415.5/，转载请声明来源钻瓜专利网。
