[发明专利]一种用激光分选提取液相细胞内物质的技术

摘要

一种用激光分选提取液相细胞内物质的技术，其特征是两束激光，光刀(激光微束)和光镊(光阱)，对细胞或细胞内物质进行有目的的损伤和分选，通过计算机控制载有样品的样品载物台在显微镜工作范围内以微米精度移动，分别用光刀和切割细胞、光镊俘获目标细胞器，移动样品载物台使目标细胞器远离杂质或细胞残骸，最后用微吸管或微分选室提取目标细胞器，最终使该细胞器与其它细胞器或细胞残骸的完全分离。本发明可直接从细胞中提取细胞内物质，实现单个目标细胞器的挑选与操控。与现有技术相比，具有样品制备容易、分选效率高、自动化程度高、操作易掌握、无损伤以及操作尺度小(达亚微米量级)等优点，本发明由于完全在液体环境中进行操作，操作条件温和，可以保持细胞组分生物活性的条件下(例如对单条染色体的分选)分选其它细胞组分。

主权项

1.一种用激光分选提取液相细胞内物质(以下简称细胞器)的技术，其特征是用两束激光，即光刀(激光微束)和光镊(光阱)，对细胞或粒子进行有目的的损伤和分选，通过计算机控制载有样品的样品载物台实现微米精度的操控，显微操作分选过程由摄录系统实时显示于视屏上并记录存储。具体分离方法是：使待分离的细胞器随样品载物台移至光刀在视场中的作用位点上，用光刀对细胞膜或结构进行破坏，释放出细胞内物质；移动样品载物台，使被选中的目标细胞器随样品载物台移至光镊在视场中的光阱中心，细胞器被光镊俘获。再次移动样品载物台，周围的杂质及细胞残骸随样品载物台一起运动，而被光镊俘获的细胞器由于受到光阱的束缚而固定不动，实现目标细胞器与周边环境的相对运动，用这种方法把该细胞器相对移动到一个比较空旷的视场中，与其它细胞器或细胞残骸的完全分离；最后用微吸管或微分选室，从样品中提取被选中的目标细胞器，最终完成分选工作。