[发明专利]可超分泌的肽及其制备方法和对一种或多种其他多肽的分泌形式的平行提高

摘要

本发明涉及形式为P_x－S_x－Bn－(ZR)－转运肽－(Z₁Z₂)－蛋白(Y)－(Z₁Z₂)－蛋白(Y_m)－T的表达盒；其中该表达盒编码转运肽，该转运肽通过序列Z₁Z₂和第二蛋白相连，该蛋白又通过Z₁Z₂和蛋白Y1相连，Y1或者和Y相对应或者和Y不同，且转运肽提高了Y和/或Y_m的分泌速率，其中P_x是以得到感兴趣蛋白的最优产量的方式所选出的任何启动子DNA序列；S_x是允许得到最优产量的任何信号或引导序列的相应编码DNA；B_n是1－15个可遗传编码的氨基酸或是化学键；Z是选自Lys和Arg的氨基酸的密码子；Z₁是选自Lys和Arg的氨基酸的密码子；Z₂是选自Lys和Arg的氨基酸的密码子；蛋白Y_m是编码能够被酵母菌生产和分泌的任何蛋白的DNA序列(m＝1－5)或是化学键(m＝0)；R是精氨酸密码子；转运肽是编码能有效运输并能够穿过细胞膜的肽的DNA序列；蛋白Y是编码能够被酵母菌生产和分泌的任何蛋白的DNA序列，并且当Y_m不是化学键时，蛋白Y的生物活性不会由于碱性二肽延伸而受损，或其允许通过羧肽酶降解此延伸；T是对表达有利的非翻译DNA序列；本发明还涉及此表达盒的生产方法及其使用。

主权项

1.如下形式的DNA分子：Px-Sx-Bn-(ZR)-转运肽-(Z1Z2)-蛋白(Y)-(Z1Z2)-蛋白(Ym)-T；其中该DNA分子编码转运肽，该转运肽通过序列Z1Z2和第二蛋白相连，该蛋白又通过Z1Z2和蛋白Y1相连，Y1或者和Y相对应或者可以和Y不同，且转运肽提高了Y和/或Ym的分泌速率，其中：Px是以能得到感兴趣蛋白的最优产量的方式所选出的任何启动子DNA序列；Sx是能允许得到最优产量的任何信号或引导序列的相应编码DNA；Bn是1-15个可遗传编码的氨基酸或是化学键；Z是选自Lys和Arg的氨基酸的密码子；Z1是选自Lys和Arg的氨基酸的密码子；Z2是选自Lys和Arg的氨基酸的密码子；蛋白Ym是编码能够被酵母菌生产和分泌的任何蛋白的DNA序列(m＝1-5)或者是化学键(m＝0)；R是精氨酸密码子；转运肽是编码能有效运输并能够穿过细胞膜的肽的DNA序列；蛋白Y是编码能够被酵母菌生产和分泌的任何蛋白的DNA序列，并且当Ym不是化学键时，蛋白Y的生物活性不会由于碱性二肽延伸而受损，或者其允许通过羧肽酶降解此延伸部分；T是对表达有利的非翻译DNA序列。