[发明专利]用于简化复合肽混合物的方法和试剂盒

摘要

本发明公开了从含有多种肽的样品中获得简化肽混合物的方法和试剂。简化样品比原来的肽样品更容易分析，而且简化样品代表了混合蛋白样品中存在的全部或者接近全部的蛋白，原来的和更复杂的肽样品来自所述混合蛋白样品。本发明方法需要使用包括氨基酸特异性反应基(R)的标记部分。标记部分在特异氨基酸位点“标记”肽或者蛋白(例如，通过和一个氨基酸反应形成共价键)，最终能够分离含有这些特异氨基酸的肽。其它方法需要使用反应部分(R_p)，所述反应部分包括和选择的蛋白共价或者非共价选择性相互作用的试剂。例如，R_p可以为被标记受体的天然配体或者与被标记的第二个蛋白相互作用的蛋白。R_p可以为酶底物或者诸如抗体，ATP，GTP，NAD，NADP，NADH，NADPH，泛素或者其结构类似物的其它分子识别元件。

主权项

1.一种鉴定样品中存在的至少一种肽的方法，所述方法包括：(a)提供具有下式的标记部分：R-L-B其中，R为和带有氨基端丝氨酸或氨基端苏氨酸的肽反应的反应基，L为一个连接基团；以及B为可以选择性结合到俘获试剂的基团；(b)将样品和标记部分反应以提供标记肽；(c)将标记肽和俘获试剂接触以提供俘获的标记肽；(d)从俘获试剂释放俘获的标记肽的至少部分肽以提供释放的修饰肽；以及(e)通过质谱分析释放的修饰肽。