[发明专利]从卷烟烟雾分离主要有害氧化剂的方法

摘要

直到目前已知的卷烟烟雾的组分，并不解释吸烟的压倒性危险效果；本发明描述了卷烟烟雾中存在的相对稳定主要有害氧化剂(cs－氧化剂)的分离，识别和结构测定过程，性能和检测，该氧化剂的含量是约190±10mg每支卷烟；cs－氧化剂单独几乎定量地解释由整体卷烟烟雾的含水萃取物产生的蛋白质氧化损伤，它也引起DNA的氧化损伤；由于cs－氧化剂是相对稳定的，它进一步解释侧流烟雾和被动吸烟的有害影响；已经发现包括维生素C的许多化合物/药剂体外预防cs－氧化剂诱导的蛋白质氧化。

主权项

1.一种分离通式1的对苯半醌的方法(通式I)该对苯半醌是来自卷烟烟雾的引起蛋白质和DNA氧化损伤的主要有害氧化剂，所述方法包括如下步骤(a)从点燃的常规过滤嘴卷烟收集焦油或cs(卷烟烟雾)溶液，(b)通过在浸入冰和盐混合物的玻璃烧瓶中点燃焦油含量为20-30mg每支卷烟的常规过滤嘴卷烟并且允许焦油冷凝并在烧瓶底部沉降，从而收集焦油，(c)保持以上所述烧瓶在室温下和在7.4-7.8的pH值范围内采用30-60mM磷酸钾缓冲剂萃取所述焦油，通过0.45μm微孔过滤器过滤以上溶液并通过加入NaOH溶液调节滤液的pH值范围为7.4-7.6，以获得所需的焦油溶液，(d)采用同等体积的二氯甲烷萃取以上所述焦油溶液三次，抛弃下部的二氯甲烷层并收集称为卷烟烟雾含水萃取物的上部黄色水层，(e)采用同等体积的水饱和的正丁醇萃取以上所述卷烟烟雾含水萃取物两次，在冷冻干燥器中在-50℃～-60℃的温度范围内在真空下冷冻干燥合并的黄色丁醇萃取物，随后采用HPLC级丙酮萃取冷冻干燥的材料两次，并在真空下干燥该丙酮溶液及采用HPLC级甲醇溶解所述丙酮萃取物，(f)使用非荧光二氧化硅板将以上所述甲醇溶液进行谱带TLC，使用比例为80∶20的甲苯和乙酸乙酯混合物展开所述二氧化硅板，取出该板并在约25-30℃下使用干燥器干燥该板，从该板两侧切割包含展开的材料的小条并在碘腔中保持它们以定位相应于Rf0.26的谱带，刮去该谱带和采用HPLC级丙酮萃取该谱带材料，随后收集丙酮层并在真空下干燥它，(g)通过加入同等体积的毫Q水而溶解显现为淡黄色针状物的以上所述丙酮萃取物，采用同等体积的HPLC级水饱和的正丁醇萃取获得的水溶液，随后在小玻璃管中在真空下干燥上部正丁醇层，以获得纯度为98-99％和收率为约18-22μg每支卷烟的主要卷烟烟雾(cs)氧化剂，(h)通过将其溶解在包括比例为90∶10(v/v)的二氯甲烷和甲醇混合物的流动溶剂中，并在0.5ml/min的流量下，在约25℃的温度下和在约29kgf/cm²的压力下，在294nm使用uv检测器将其注入具有正相25cm二氧化硅柱的HPLC仪器，从而精制在步骤(g)中获得的以上所述cs氧化剂，随后收集在8.808min的保留时间下显现为单峰的流出物，精制后的母焦油溶液中的总cs氧化剂纯度为100％和收率为8.4％。