[发明专利]应用热对流进行核酸序列扩增的方法和装置有效
申请号: | 02820409.3 | 申请日: | 2002-09-14 |
公开(公告)号: | CN1571849A | 公开(公告)日: | 2005-01-26 |
发明(设计)人: | 黄贤镇;金廷姬;郑敬勋 | 申请(专利权)人: | 阿赫姆生物系统公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 | 代理人: | 刘晓东 |
地址: | 韩国*** | 国省代码: | 韩国;KR |
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摘要: | 本发明提供一种核酸序列扩增方法和其装置,其设计简单,易于微型化和一体化为复合装置,能够使用非热稳定性DNA聚合酶。本发明中,多个热源结合在一起向样品的特定区域提供或者移走热量,通过将较高温度区域定位在高度上低于较低温度区域,从而在样品内部维持一个特定空间温度分布。 | ||
搜索关键词: | 应用 对流 进行 核酸 序列 扩增 方法 装置 | ||
【主权项】:
1.一种应用聚合酶链式反应(PCR)的核酸序列扩增方法,该方法包括:将样品注入反应容器的步骤,该样品包含具有待扩增的靶核酸序列的模板DNA、DNA聚合酶、脱氧腺苷三磷酸、脱氧胞苷三磷酸、脱氧鸟苷三磷酸、脱氧胸苷三磷酸,以及至少两条和每个靶核酸序列3’末端互补的寡核苷酸引物;和通过多个热源与样品进行热接触在样品中维持特定的空间温度分布的步骤,该热源向样品特定区域提供热量或者从特定区域移走热量,使得温度较高的区域在高度上低于温度较低的区域,其中特定空间温度分布包含这样的特定空间区域,每个特定空间区域各自执行一个温度条件,所述的温度条件适合于(i)变性步骤,其中双链DNA被分离成单链DNA,(ii)退火步骤,其中变性步骤中形成的单链DNA与引物杂交形成的DNA-引物复合物,或(iii)聚合步骤,其中通过聚合反应使DNA-引物复合物中的引物得以延伸,并且其中的特定空间温度分布是通过热对流引导样品循环的温度分布,由此变性、退火以及聚合步骤在样品内依次和重复发生。
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