[发明专利]细胞内制备单链DNA无效
| 申请号： | 02828039.3 | 申请日： | 2002-12-13 |
| 公开（公告）号： | CN1620503A | 公开（公告）日： | 2005-05-25 |
| 发明（设计）人： | 彼得·M·格拉泽 | 申请（专利权）人： | 耶鲁大学 |
| 主分类号： | C12N15/00 | 分类号： | C12N15/00;C12Q1/68;C07H21/02;C07H21/04 |
| 代理公司： | 北京市柳沈律师事务所 | 代理人： | 巫肖南;封新琴 |
| 地址： | 美国康*** | 国省代码： | 美国;US |
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| 摘要： | 本发明提供细胞内产生单链DNA分子的方法，该DNA分子在介导三链体依赖性或非依赖性染色体事件中具有活性。该方法所依据的发现即是将病毒载体或质粒导入细胞，它们在被改造的细胞内生成单链DNA分子，该DNA分子结合于目标染色体DNA从而形成三链体，该三链体可以诱导所需要的突变和/或进行基因重组并通过掺入供体DNA分子诱导染色体DNA的改变。上述载体或质粒不仅可编码TFO和任意供体DNA，而且可编码一种逆转录酶和任选一种限制酶，这在优选实施例中呈现为一种融合蛋白，逆转录上述载体或质粒编码的RNA，接着在一个限制酶切位点切割产生单链DNA。该单链DNA可以被直接生成或最初作为双链茎－单链环结构，然后被切割生成单链DNA。 | ||
| 搜索关键词： | 细胞内 制备 dna | ||
【主权项】：
1.在目标染色体核酸分子中诱导一种特异变化的方法，包括以下步骤：(a)导入细胞内编码逆转录酶的一种核酸分子；和(b)导入细胞内一种编码RNA的核酸分子，该RNA分子将在该细胞内被逆转录酶逆转录成单链DNA；这其中上述单链DNA分子结合于细胞内目标染色体核酸分子形成螺旋以诱导位点特异性变化和/或介导与目标染色体核酸分子的重组。
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