[发明专利]重组胎盘生长因子的制备方法无效
申请号: | 02828331.7 | 申请日: | 2002-02-05 |
公开(公告)号: | CN1620465A | 公开(公告)日: | 2005-05-25 |
发明(设计)人: | D·玛格里尼;M·巴缇斯特;E·康缇;G·萨尔维亚;M·图斯 | 申请(专利权)人: | 盖莫纳股份公司 |
主分类号: | C07K14/475 | 分类号: | C07K14/475;C12N15/12 |
代理公司: | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 | 代理人: | 程泳 |
地址: | 意大利*** | 国省代码: | 意大利;IT |
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摘要: | 提取和纯化在诱导型原核表达系统中表达的重组胎盘生长因子(PLGF)的方法包括下列步骤:I)细菌细胞的发酵,II)内含体的提取和纯化,III)表达蛋白的复性,IV)离子交换层析,V)反相层析。 | ||
搜索关键词: | 重组 胎盘 生长因子 制备 方法 | ||
【主权项】:
1.一种提取和纯化在修饰的原核细胞中的诱导型表达系统中表达的重组胎盘生长因子(PLGF)的方法,包括下列步骤:I)该原核细胞的发酵,II)内含体的提取和纯化,III)所表达蛋白的复性,IV)离子交换层析,V)反相层析,其特征在于实施步骤(I)直到培养基在600nm的光密度达到1至50(OD6001-50),随后诱导;步骤(II)包括裂解培养细胞,使DNA断裂和分离内含体;在步骤(III)中,内含体溶于变性缓冲液中并使表达蛋白至少部分恢复为二聚体形式;在步骤(IV)和(V)中,二聚体和多聚体形式的表达蛋白与单体形式分开并分离。
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