[发明专利]非抗生素抗性穿梭质粒表达载体及其构建方法和应用无效
申请号: | 03100415.6 | 申请日: | 2003-01-13 |
公开(公告)号: | CN1482247A | 公开(公告)日: | 2004-03-17 |
发明(设计)人: | 王春凤;秦泽荣;孙哲;刘尚高 | 申请(专利权)人: | 王春凤;孙哲 |
主分类号: | C12N15/64 | 分类号: | C12N15/64;C12N15/65;C12N15/74;C12N15/70;C12N1/21;A23C9/123;A61K35/74;A23K1/16 |
代理公司: | 长春科宇专利代理有限责任公司 | 代理人: | 李恩庆 |
地址: | 130118吉林省长春市*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | 本发明属于生物工程技术领域,是一种非抗生素抗性穿梭质粒表达载体及构建方法和应用。本发明是把基本质粒载体pMG36e,经限制性内切酶EcoRI在其酶切位点上酶切,成为线型。在近红霉素Er端连接非抗生素抗性基因,之后环化回环状。再在这个环上把红霉素基因Er用内切酶去除,形成非抗生素抗性穿梭表达质粒载体。将人或动物疾病的保护性抗原基因连接入本发明的非抗生素抗性质粒载体,可以制造功能性食品,对特定疾病具有预防、保护作用的细菌悬液、口服补剂、管饲产品以及动物性疫苗。本发明用非抗生素可行基因替代红霉素基因,在使用过程中不存在抗生素抗性基因扩散的问题。 | ||
搜索关键词: | 抗生素 抗性 穿梭 质粒 表达 载体 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】:
1.一种非抗生素抗性穿梭质粒表达载体,其特征是先在基本质粒载体pMG36e的酶切位点上进行酶切,再在近红霉素Er端连接非抗生素抗性基因,最后除去红霉素抗性基因Er,用pMG425t表示,表达式为: pMG36e+ThyA/(β-Gal)-Er=pMG425t式中,pMG36e为基本质粒载体,它含有红霉素抗性基因,可在大肠杆菌和乳酸杆菌中表达,ThyA/(β-Gal)为非抗生素抗性基因,Er表示红霉素抗性基因,+号表示连接,-号表示去除,=号表示形成,pMG425t表示本发明的非抗生素抗性穿梭表达质粒载体。
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