[发明专利]肽酰-脯酰-顺/反异构酶活性细胞内分析检测方法无效
申请号: | 03112442.9 | 申请日: | 2003-06-25 |
公开(公告)号: | CN1473939A | 公开(公告)日: | 2004-02-11 |
发明(设计)人: | 吉爱国;J·W·恩格斯 | 申请(专利权)人: | 山东大学 |
主分类号: | C12Q1/533 | 分类号: | C12Q1/533;C12Q1/68;G01N33/52 |
代理公司: | 济南三达专利事务所 | 代理人: | 孙君 |
地址: | 250012*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 肽酰-脯酰-顺/反异构酶活性细胞内分析检测方法,属于生物技术领域。包括构建融合基因,以含有X-Pro键、在PPIases催化下通过顺反异构实现正确折叠的蛋白质或多肽作为媒介蛋白质与绿色荧光蛋白GFP融合,表达融合蛋白,通过荧光观测手段,观察GFP的绿色荧光,指示和分析检测PPIases在微生物、植物和动物细胞内的活性。本发明的方法可用于活细胞内PPIases活性检测,引入融合基因的细胞可直接用作PPIases相关研究的模式菌,模式菌可采用微生物和细胞培养方法进行扩增、繁殖,长期使用,可用荧光显微镜直接观察GFP荧光,以确定PPIases在细胞内的活性,简单、灵敏、直观、方便。 | ||
搜索关键词: | 肽酰 脯酰 反异构酶 活性 细胞内 分析 检测 方法 | ||
【主权项】:
1.一种肽酰-脯酰-顺/反异构酶活性细胞内分析检测方法,包括构建融合基因,以含有X-Pro键,在PPIases催化下通过顺反异构实现正确折叠的蛋白质或多肽作为媒介蛋白质与绿色荧光蛋白GFP融合,表达融合蛋白,通过荧光观测手段,观察GFP的绿色荧光,指示和分析检测PPIases在微生物、植物和动物细胞内的活性。
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