[发明专利]一种聚合酶链反应介导的DNA结合蛋白检测试剂及使用方法无效
申请号: | 03112916.1 | 申请日: | 2003-03-05 |
公开(公告)号: | CN1435491A | 公开(公告)日: | 2003-08-13 |
发明(设计)人: | 陆祖宏;白云飞;葛芹玉;王进科;李同祥 | 申请(专利权)人: | 东南大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 南京苏科专利代理有限责任公司 | 代理人: | 奚胜元 |
地址: | 210096 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明涉及的是一种聚合酶链反应介导的DNA结合蛋白检测试剂及使用方法。其检测试剂是一组双链寡核苷酸序列,每一双链寡核苷酸序列的中间部分包含一种待检测的DNA结合蛋白的DNA识别序列以及特定的限制性内切酶的识别序列,并使二者紧密相连。其使用方法为(1)将双链寡核苷酸检测试剂加入含有待测蛋白的溶液中进行孵育,使溶液中的DNA结合蛋白与其对应的双链寡核苷酸充分结合;(2)在上述溶液中加入相应的限制性内切酶进行充分消化,使未结合蛋白的双链寡核苷酸被内切酶切断;(3)在酶切产物中加入蛋白酶K完全消化,除掉产物中的蛋白质;(4)消化产物进行PCR扩增;(5)检测PCR产物,获得溶液中DNA结合蛋白的信息。 | ||
搜索关键词: | 一种 聚合 反应 dna 结合 蛋白 检测 试剂 使用方法 | ||
【主权项】:
1、一种聚合酶链反应介导的DNA结合蛋白的检测试剂,其特征在于针对一组被检测的DNA结合蛋白质,设计和制备一组双链寡核苷酸序列,其中每一双链寡核苷酸序列的中间部分包含一种待检测的DNA结合蛋白的特异性识别序列以及特定的DNA限制性内切酶的识别序列,并使二者紧密相连;在双链寡核苷酸中除DNA结合蛋白识别序列外的序列是一致的。
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