[发明专利]离体胃粘膜细胞分离方法及相应的纯化方法无效

专利信息
申请号: 03114260.5 申请日: 2003-04-21
公开(公告)号: CN1539961A 公开(公告)日: 2004-10-27
发明(设计)人: 宋于刚;孙凤蓬 申请(专利权)人: 宋于刚;孙凤蓬
主分类号: C12N5/06 分类号: C12N5/06;C12M3/00
代理公司: 广州三环专利代理有限公司 代理人: 戴建波
地址: 510515广东省*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 一种离体胃粘膜细胞分离方法及相应的纯化方法,其特征为:所述的分离方法依次包括粘膜细胞收集、溶液纯化稀释、物理因素分离三个步骤;其中,粘膜细胞收集步骤包括刮取胃粘膜上皮的操作;溶液纯化稀释步骤依次包括获得洁净粘膜上皮的初步清洗操作、为获得的洁净粘膜上皮碎末而进行的机械破碎操作、为获得粘膜细胞沉淀而进行的初步机械分离操作、以及为得到粘膜细胞悬液进行的纯化/稀释与离心分离交替操作,而且纯化/稀释与离心分离交替操作中采用了向离心分离管中所盛的粘膜细胞溶液进行通气兼搅拌方法;物理因素分离步骤是为获得粘膜细胞清液进行的过筛操作。本发明的分离方法对胃粘膜细胞伤害最轻、且简单快捷。
搜索关键词: 离体胃 粘膜 细胞 分离 方法 相应 纯化
【主权项】:
1、一种离体胃粘膜细胞分离方法,其特征在于:所述的方法依次包括粘膜细胞收集、溶液纯化稀释、物理因素分离三个步骤;其中,所述的粘膜细胞收集步骤包括采用机械刮具在离体或活体的胃内壁上刮取胃粘膜上皮的操作;所述的溶液纯化稀释步骤依次包括将刮取下来的胃粘膜上皮投入溶液中以获得洁净粘膜上皮的初步清洗操作、在上述的清洗溶液中为获得的洁净粘膜上皮碎末而进行的机械破碎操作、从获得的洁净粘膜上皮碎末溶液中为获得粘膜细胞沉淀而进行的初步机械分离操作、以及为得到粘膜细胞悬液而对上一操作所获的粘膜细胞沉淀重复数次地进行的纯化/稀释与离心分离交替操作,而且所述的纯化/稀释与离心分离交替操作中采用了向离心分离管中所盛的粘膜细胞溶液进行通气兼搅拌方法;所述的物理因素分离步骤是为获得粘膜细胞清液而对溶液纯化稀释步骤所获的粘膜细胞悬液进行的过筛操作。
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