[发明专利]鞋式导管在体局部导入基因的方法

摘要

本发明公开了一种用鞋式导管定向在体局部导入基因药物的方法，其特点为定位准确、直接导向心血管靶点、简易、无毒副作用，且可用于临床，该鞋式导管局部导入靶点的药物浓度，在一定范围内呈压力依赖性，且药物可在局部高浓度持续存在至少24小时，在体局部导入的基因药物可抑制体内某些基因的表达，达到防治心血管疾病的作用。如用鞋式导管向损伤的髂动脉壁内定和导入的c－myc反义寡核苷酸可抑制动脉血管壁损伤后c－myc原癌基因的超常表达，抑制血管平滑肌细胞增生和血管狭窄。该鞋式导管定向在体局部导入基因药物的方法，将基因治疗疾病从动物实验走向临床应用的重要手段。

主权项

1.一种鞋式导管在体局部导入基因的方法，其特征在于，至少包括以下步骤：第一步：采用鞋式导管，先经鞘管内腔送入标准血管成形导管，在靶点血管处，球囊成形后，松球囊，然后将外鞘尖端给药区和PTCA球囊导管一起送至球囊血管成形处，再打起PTCA球囊导管(1.5atm)后，经三通联接管用压力泵经外鞘局部给药于损伤处血管壁；经血管局部导入同位素锝99测定血管局部浓度，评价局部给药的可行性；第二步：经鞋式导管在体导入c-myc反义寡核苷酸1)寡核苷酸的合成核苷酸序列选自人的c-myc基因第二外显子中(从4521到4536)的15个核苷酸；c-myc正义核苷酸：5’ATGCCCCTCAACGTTc-myc反义核苷酸：3’TACGGGGAGTTGCAA用硫代磷酸盐修饰核苷酸，PAGE纯度(摩尔比)99％；2)用苯巴比妥耳缘静脉麻醉(30mg/kg)，常规消毒后，先分离、暴露活体物的右股动脉，作一小切口后，经股动脉放入带有标准血管成形导管(球囊直径3.0mm)的鞋式导管，将导管送至腹主动脉中、下端时，通过压力泵使标准血管成形导管的球囊充盈(6atm)后，强行将其缓慢回撤至切口处，如此反复进行3次；每次30s-60s，造成血管壁内膜损伤，然后松球囊，使之退入鞋式导管鞘内，连同鞋式导管的尖端一并送至髂动脉处，打起球囊(1.5ml)，经鞘管尖端导入c-myc反义寡核苷酸426umol/L0.5ml后，经三通开关给生理盐水1.5ml，给药时间＜30秒，所用压力为5atm，给药后局部做标记，从切口处结扎股动脉，外科缝合，关闭切口；3)经鞋式导管局部导入基因药物c-myc反义寡核苷酸观察在体表达效应，评价是否能导入基因药物，导入基因药物是否在体表达。