[发明专利]一种超高退火温度聚合酶链式反应方法及其应用无效
申请号: | 03114917.0 | 申请日: | 2003-01-16 |
公开(公告)号: | CN1517441A | 公开(公告)日: | 2004-08-04 |
发明(设计)人: | 徐定邦;朱德芬;谢文凯;徐文慧 | 申请(专利权)人: | 徐定邦;徐文慧 |
主分类号: | C12P19/34 | 分类号: | C12P19/34 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 200071上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及一种聚合酶链式反应的方法及其应用。提供了一种在超高退火温度下进行PCR反应的方法,采用具有高解链温度的引物,能在72-82℃高退火温度下完成扩增,大大高于常规的72℃的退火温度上限,突破了PCR反应设计的普遍认知和人为限制,使PCR循环步骤亦随之简化为高温变性和退火延伸两步。实验发现该方法不但同样可以成为一种普遍应用的PCR,而且利用超高温变性来提高反应的专一性,使本发明在排除非专一性扩增产物和排除假阴性结果等方面有着独特的作用,具有广泛的应用前景。 | ||
搜索关键词: | 一种 超高 退火 温度 聚合 链式反应 方法 及其 应用 | ||
【主权项】:
1.一种超高退火温度的聚合酶链式反应方法,依次包括如下步骤:(1)模板变性;(2)引物与模板退火;(3)DNA聚合酶催化下延伸合成互补DNA链;(4)按步骤(1)-(3)循环进行扩增反应;其特征在于,引物与模板退火温度为72-82℃。
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