[发明专利]微生物连续催化法生产丙烯酰胺

摘要

本发明属微生物技术领域。本发明公开了一种微生物连续催化法，生产丙烯酰胺。本发明应用丙酸棒杆菌，并实施游离细胞分离连续反应，提高生产效率、减少环境污染、降低成本，产品纯度高，宜于规模生产。

主权项

1、一种微生物连续催化法生产丙烯酰胺的方法，其特征在于该方法，包括下列步骤：(1)产酶细胞的制备：先进行发酵种子的培养，在三角瓶或种子罐中装入10-70％的种子培养基，灭菌后接入1-10％菌种，在20-40℃下，旋转式摇床中100-400rpm，振荡培养30-120小时，然后在50L-20m3的发酵罐其发酵培养基装入量为40％-70％，实罐消毒后接入2-7％的种子液，在通气量1∶0.2-1∶1，V.V.M；搅拌转速：50-400rpm；罐压0.03-0.06MP；温度：20-40℃，发酵30-200小时；(2)连续催化水合生产过程：将发酵液在分离因素≥3000，离心分离，去上清液，获得产腈水合酶细胞；将细胞悬浮于去离子水或者纯净水或PH7.0-8.0的缓冲液中，加入到反应釜中，发酵液与反应液体积的比例维持在≥1％，在5-55℃的温度下，50-300rpm的搅拌速度下进行酶催化反应，当产物浓度≥5％时，开始通过膜过滤系统出产物，同时开始补加丙烯腈和水，该类膜过滤系统让产物通过，并达到去除蛋白质及其它杂质，而能使游离细胞重新返回反应釜参与反应，通过调节丙烯腈和水的流加速度和产物丙烯酰胺溶液的流出速度，从而使流出的产物丙烯酰胺溶液浓度保持在设定的范围，底物丙烯腈的浓度最低可小于30ppm，最终转化率为≥99.9％。