[发明专利]应用唯一引物的聚合酶链式反应方法及其应用无效
申请号: | 03117012.9 | 申请日: | 2003-05-20 |
公开(公告)号: | CN1548543A | 公开(公告)日: | 2004-11-24 |
发明(设计)人: | 徐定邦;朱德芬;谢文凯;徐文慧 | 申请(专利权)人: | 徐定邦;徐文慧 |
主分类号: | C12P19/34 | 分类号: | C12P19/34;C12Q1/68 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 200071上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明提供使用唯一引物来完成PCR或RT-PCR的方法及其应用,整个反应的引物为唯一的根据模板DNA链顺序特征而设计的寡聚核苷酸链,引物3'端6-12个碱基与模板顺序完全互补,而5'端则采用柔性设计。突破了经典PCR理论中使用一对引物完成扩增的技术常规,克服了由于正反引物对模板DNA链的结合效率有所不同可能造成的对扩增效率的负面影响,也完全避免了正反引物间的3'端碱基的互补。适合应用于人类和病原微生物基因的PCR或RT-PCR检测,也可用于多重RCP或RT-PCR反应以减少引物间的相互影响,或者作为其他PCR/RT-PCR的内参照反应,减少了一对引物作为内参照时的引物间影响和扩增效率差异,有助获得可靠的定量或半定量结果。 | ||
搜索关键词: | 应用 唯一 引物 聚合 链式反应 方法 及其 | ||
【主权项】:
1.一种聚合酶链式反应方法,依次包括如下步骤:(1)模板变性;(2)引物与模板退火;(3)DNA聚合酶催化下延伸合成互补DNA链;(4)按步骤(1)-(3)循环进行扩增反应。其特征在于整个反应的引物为唯一的一条寡聚核苷酸链。
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