[发明专利]一种莲藕DNA指纹图谱构建的分子标记方法

摘要

本发明公开了一种莲藕DNA指纹图谱构建的分子标记方法，其步骤是：首先是DNA提取，剪取莲藕幼嫩叶片，提取总DNA；其次是PCR扩增，对引物进行筛选，对莲藕品种的基因组进行扩增；第三是PCR产物鉴定，扩增产物在琼脂糖凝胶中电泳，EB染色后用扫描仪扫描记录；第四是数据分析，根据照片上各材料各引物扩增情况作记录，计算莲藕品种间的相似系数，进行聚类分析；第五是DNA指纹图谱的构建，根据照片上引物扩增情况，绘制莲藕的DNA指纹图谱。本发明过程简便，操作方便、安全，结果准确、有效，该方法适用于莲藕品种登记和鉴定。

主权项

1、一种莲藕DNA指纹图谱构建的分子标记方法，其步骤：A、DNA提取，对莲藕品种剪取幼嫩叶片，按高盐低PH法提取总DNA；B、PCR扩增，对10-mer引物进行筛选，并使用PCR热循环仪分别对莲藕品种的基因组DNA进行扩增，温度控制在32-37℃，在PCR热循环仪上循环42-47周期；C、PCR产物鉴定，扩增产物在1.5％琼脂糖凝胶中电泳，EB染色后用扫描仪扫描记录；D、数据分析，根据照片上各材料各引物扩增情况作记录，有带记为1，无带记为0，按Nei的方法计算莲藕品种间的相似系数，再按平均距离法进行聚类分析；E、DNA指纹图谱的构建，根据照片上引物扩增情况，挑取具有代表性的RAPD多态性带，绘制莲藕品种的DNA指纹图谱。