[发明专利]一种一管式反转录聚合酶链式反应无效
| 申请号： | 03128897.9 | 申请日： | 2003-05-29 |
| 公开（公告）号： | CN1552886A | 公开（公告）日： | 2004-12-08 |
| 发明（设计）人： | 徐定邦;朱德芬;谢文凯;徐文慧 | 申请（专利权）人： | 徐定邦;徐文慧 |
| 主分类号： | C12P19/34 | 分类号： | C12P19/34;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 200071上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种一管式反转录聚合酶链式反应方法及其在提高RT－PCR和多重RT－PCR反应专一性中的应用，特别涉及缩短反转录反应时间至0.5－15分钟、扩展常温反转录酶MMLV和AMV的反转录步骤的反应温度范围为4－37℃或50－75℃和减少反转录酶的用量至MMLV4－50单位/μg总RNA模板或AMV4－50单位/μg总RNA模板的技术方案，使反应加快、反应专一性获得显著提高。本发明适用于实验室用RT－PCR试剂盒和医学核酸检测用RT－PCR试剂盒的方案设计和制备。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 一管式反 转录 聚合 链式反应 | ||
【主权项】：
1.一种一管式反转录聚合酶链式反应方法，其步骤依次包括：(1)在反转录酶催化下，依据RNA链合成DNA模板；(2)DNA模板变性解链；(3)引物与模板退火；(4)在DNA聚合酶催化下合成互补DNA链；(5)按步骤(2)-(4)循环进行合成反应；其特征在于步骤(1)的反应时间为0.5-15分钟。
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